月份：2022年5月

细胞增殖-毒性检测–CCK-8试剂盒,同仁Dojindo CK04

cell counting kit-8 简称cck-8试剂盒，为mtt法的替代方法，是一种基于wst（水溶性四唑盐，化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2h-四唑单钠盐）的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验
使用说明：
一、制作标准曲线（测定细胞具体数量时）
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量，然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度，一般要做3-5个细胞浓度梯度，每组3-6个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁，然后加cck-8试剂培养一定时间后测定od 值，制作出一条以细胞数量为横坐标（x 轴），od 值为纵坐标（y 轴）的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量（试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致，便于确定细胞的接种数量以及加入cck-8后的培养时间。）
二、细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液（100μl/孔）。将培养板放在培养箱中预培养（在37℃,5% co2的条件下）。
2、向每孔加入10μl cck-8溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响od值的读数）。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定od值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μl 0.1m的hcl或者1%sds(w/v)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测
1、在96孔板中配置100 μl 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时（在37 ℃，5% co2的条件下）。
2、向培养板加入10μl不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间（例如：6、12、24或48小时）。
3、向每孔加入10 μl cck-8溶液（注意不要在孔中生成气泡，它们会影响od值的读数）。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加cck-8之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
6、如果暂时不测定od 值，打算以后测定的话，可以向每孔中加入10μl 0.1m的hcl或者1%sds(w/v)溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。

活力计算：.
细胞活力（％）=[a(加药)－a(空白)]／[ a(0加药)－a(空白)]×100
a（加药）：具有细胞、cck-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
a（空白）：具有培养基和cck-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
a（0 加药）：具有细胞、cck-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力
注意事项：
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入cck-8试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准96 孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μl培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10% 加入cck-8溶液。
④如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片，但是450nm检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去，因此不会对检测造成影响。

【100T】Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST

CK12-100T

操作简便，通过2种方法检测细胞毒性的LDH检测试剂盒。换液不换液都可使用。

CCK-8反应终止液

Stop Solution for CCK-8

货号：CK13

Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒

货号：CK18-200tests*3

ATP是生物体内最直接的能量来源，在肌肉收缩、代谢反应、主动运输等方面被广泛使用，甚至被称作生物体内的能量货币。同仁化学研究所开发的Cell Counting Kit-Luminescence试剂盒是一种通过Luciferase来确定细胞中的腺苷三磷酸（ATP）的细胞增殖-毒性检测试剂盒。

本试剂盒只需将各试剂混合后加入孔板，10 分钟后即可检测。不需要去除培养基、清洗细胞等复杂的操作。此外，本试剂盒还有诸如发光的半衰期在3 小时以上、数据的重现性高 、兼容96孔板 、384孔板的多样品检测等诸多优点。

日本DOJINDO,同仁化学,CCK-8试剂盒,超氧阴离子和羟自由基检测ESR,DMPO

cell counting kit-8细胞增殖毒性检测试剂盒cck-8(cck8)

cell counting kit-8是用于化学药物等对细胞增殖或毒性实验时进行细胞计数的试剂盒。试剂盒中使用高灵敏度的新型水溶性四唑盐wst-8甲臜染料作为显色底物，与传统的细胞计数试剂盒相比，灵敏度大幅度的提高。wst-8被细胞内的脱氢酶还原产生水溶性的甲臜染料。通过直接测量甲臜染料（450 nm）的吸光度，即可测出活细胞的数量。细胞数量与甲臜染料成正比关系。同时试剂盒为配置好的1瓶溶液，易于使用。

产品特点

1）对比[3h]法，无需放射性同位素。

2）使用水溶性四唑盐与水溶性甲臜染料，因此无需dmso换液操作步骤。（如mtt分析等需要）

3）与其他水溶性四唑盐法（xtt，mts）相比，灵敏度更高的同时毒性更低。

4）试剂盒为1瓶装，无需提前配置，无需准备其他试剂。

5）试剂盒稳定性高。

6）试剂可以与酚红同时使用。

TPPS,T003-1g

TPPS是水溶性卟啉，在pH 6.5的水溶液中为红紫色（最大波长：413 nm，摩尔吸光系数：5.1×105），pH 4时呈绿色（最大波长：434 nm，摩尔吸光系数：5.0×105）。据报道，它的质子解离常数为pKa1=4.86，pKa2=4.96。TPPS在酸性条件下选择性地与Cu2+形成复合物，在碱性条件与Cd、Cu、Fe、Pb和Pd形成复合物。

超氧阴离子和羟自由基检测（ESR）——DMPO

DMPO (货号: D048)
同仁化学研究所 (Dojindo) 的DMPO没有杂质 (*) 检出
以羟自由基的Fenton反应(黑色)和空白(蓝色)为例
同仁化学研究所(Dojindo)的峰更清晰，S/N比例更高
Ⅰ. 概述
活性氧具有调节许多重要细胞功能的作用，它和人体衰老、多种人类疾病，如癌症、糖尿病有关。自旋捕捉ESR技术
是一种检测活性氧的最可靠的办法，它能提供具有特征的ESR信号。DMPO采用一种特殊的敏感方法，可以捕捉超氧
阴离子和羟自由基等，分别产生独特的ESR光谱。因此它是探测生物系统内ROS的强有力工具。同仁化学研究所的
DMPO具有很高的纯度，和其他产品相比，它的最大优点是使用前不需要再纯化，使您的ESR检测变得更容易。
Ⅱ. 常规参数
名称：5,5-Dimethyl-1-pyrroline N-oxide
性状：无色液体
纯度：≥99% (GC)
分子量：113.16，C6H11NO
保存条件：-20℃，防潮，避光
运输条件：蓝冰
CAS：3317-61-1

CCK8试剂盒,cck-8细胞增殖毒性检测试剂盒,日本同仁,日本DOJINDO

ck8试剂盒日本同仁 cck-8细胞增殖毒性检测试剂盒
cell counting kit-8（cck-8试剂盒）是由同仁化学研究所（dojindo）开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒，为mtt法的替代方法，试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-wst-8，在美国，欧洲等国家地区均持有专利，同仁化学研究所于2006年在中国获得了wst-8的注册商标。
日本同仁 细胞增殖-毒性检测试剂盒ck04cck-8 wst-8 500次/盒
与普通的mtt法相比，cck8试剂盒日本同仁具有显著特点：
★灵敏度高，数据可靠，重现性好
★操作简便，省时省力
★水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
★无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
★为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
★适合于高通量药物筛选
cck-8用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验

规格： 500孔 产品货号： ck04
规格： 1000孔 产品货号： ck04
规格： 3000孔 产品货号： ck04
规格： 10000孔 产品货号： ck04

本公司还提供以下产品：
特级胎牛血清（fetal bovine serum, certified） gibco16000-044 美洲血源 500ml 现货特价
优级胎牛血清（fetal bovine serum, qualified） gibco10099-141 澳洲血源 500ml 现货特价
特级胎牛血清 fetal bovine serum （fbs） 产地:美国 hyclone sh30070.03 500ml 现货特价
胎牛血清（fetal bovine serum） hyclone sv30087.02 南美血源 500ml 现货特价
胎牛血清（fetal bovine serum） hyclone sv30087.01 南美血源 100ml 现货特价
供体马血清 hyclone sh30074.02 100ml 现货特价优质胎牛血清（fetal bovine serum gold） paa a15-151 500ml 现货特价
普通胎牛血清（fetal bovine serum standard quality） paa a15-101 500ml 现货特价
hyclone 30087.01（南美普通胎牛血清）100ml
hyclone 30087.02（南美普通胎牛血清）500ml
hyclone 30084.03（澳洲血源）500ml
hyclone 30070.03（北美特级胎牛血清）500ml
hyclone 30396.03（加拿大血源）500ml
gibco 16000-044（美洲血源）500ml
gibco 10099-141（澳洲血源）500ml
gibco c2027050 （南美乌拉圭）500ml
gibco 16141-079 胚胎干细胞专用胎牛血清 500ml
paa a15-101 德国paa 普通胎牛血清 500ml
paa a15-151 德国paa 优级胎牛血清 500ml
美国gibco 26400-044 （gibco透析型胎牛血清） 500ml
美国gibco 16141-079 （gibco干细胞胎牛血清） 500ml
美国gibco 16140-071 （gibco灭活过胎牛血清） 500ml
美国gibco 10439-024 （gibco胚胎干细胞专用胎牛血清） 500ml
sh30070.03e （hyclone干细胞胎牛血清） 500ml
sh30068.03（hyclone活性炭处理胎牛血清） 500ml

Cell Cycle Assay Kit – PI/RNase Staining-无需提前固定细胞周期检测试剂盒 (PI/RNase Staining)

Cell Cycle Assay Kit – PI/RNase Staining试剂盒，可快速完成细胞周期的分析，操作简便，无需固定。本产品使用碘化丙啶 (PI) 作为DNA荧光染料，通过流式细胞术得到细胞周期中G0/G1，G2和S期细胞的比例。

日本DOJINDO,同仁化学,细胞增殖-毒性检测试剂盒CK04,Cell Counting Kit-8(CCK-8)CK04

cck-8试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为：该试剂中含有w st ® -8 [ 其化学名称为：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2, 4-二磺酸苯)-2h -四唑单钠盐 ] ，它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪硫酸二甲酯 ( 1 – m et hoxy pm s ) 的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臢染料 ( form azan dye )。生成的甲臢物的数量与活细胞的数量成正比，因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验

产品特点
1.简单、安全、重现性好。无需有机溶剂和放射性同位素，步骤少，无损失，结果准确
2.灵敏度高。灵敏度高于mtt、xtth和mts

试剂稳定性比较

 

Cell Counting Kit-8可冷藏保存1年以上，避免试剂浪费！

试剂毒性评价

试剂本身对细胞毒性的比较

HeLa细胞在96孔板中孵育(5000个/孔)。在CO2培养箱中开始显色反应，每隔3、6、24小时在显微镜下观察细胞形态。Cell Counting Kit-8在24小时后细胞形态没有改变。在使用药物进行细胞毒性试验时，应选择测量试剂本身对细胞毒性影响更小的试剂。

Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖/毒性检测试剂,日本DOJINDO同仁化学产品

Cell Counting Kit-8(CCK-8)细胞增殖／毒性检测试剂

Cell Counting Kit-8是用于化学药物等对细胞增殖或毒性实验时进行细胞计数的试剂盒。试剂盒中使用高灵敏度的新型水溶性四唑盐WST-8甲臜染料作为显色底物，与传统的细胞计数试剂盒相比，灵敏度大幅度的提高。WST-8被细胞内的脱氢酶还原产生水溶性的甲臜染料。通过直接测量甲臜染料（450 nm）的吸光度，即可测出活细胞的数量。细胞数量与甲臜染料成正比关系。同时试剂盒为配置好的1瓶溶液，易于使用。

CCK-8使用例

CCK-8与LDH

Cell Counting Kit-8 与Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST同时检测细胞毒性

检测药物： Mitomycin C

细胞: HeLa

培养基: MEM, 10% FBS

孵育条件: 37℃, 5% CO2, 48小时

检测波长: Cell Counting Kit-8 (450 nm), Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST® (490 nm)

使用Mitomycin C 检测检测HeLa细胞毒性。通过使用Cell Counting Kit-8和Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST® [货号: CK12]两种方法检测。Cell Counting Kit-8以细胞活性为指标，Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST以游离的LDH为指标，实验证实两种指标检测存在差异性。二者联用，能更全面的表征细胞毒性。

《cck-8法与mtt法相比的显著特点》

★  灵敏度高，数据可靠，重现性好
★  操作简便，省时省力
★  水溶性，不需要换液，尤其适合于悬浮细胞
★  无需放射性同位素和有机溶剂，对细胞毒性低
★  为1瓶溶液，毋需预制，即开即用
★  适合于高通量药物筛选
《cck-8用途》
药物筛选、细胞增殖检测、细胞毒性检测、肿瘤药敏试验
《cck-8毒性》
cck-8和其他检测方法对比可以得出cck-8对细胞几乎无毒性，不伤害细胞，细胞可重复利用。
《原理图》　
cell counting kit-8(cck-8)利用了同仁化学研究所(dojindo)开发的四唑盐——wst-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2h-四唑单钠盐)，它在电子载体1-methoxy pms存在的情况下能够被还原成水溶性的甲臜染料。cck-8溶液可以直接加入到细胞样品中；不需要预配各种成分。cck-8法是用于测定细胞增殖或细胞毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。cck-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲臜染料能够溶解在组织培养基中，生成的甲臜量与活细胞数量成正比。wst-8法检测细胞增殖、细胞毒性实验的灵敏度比其它四唑盐如mtt, xtt, mts或wst-1高。由于cck-8溶液相当稳定，并且对细胞没有毒性，因此可以长时间孵育。
《cck-8 检测步骤》
1：向各孔中加入100 μl细胞悬液a)。
2：在37℃下预孵育培养板b)。
3：向各孔中加入各浓度的待测溶液c)10 μl。
4：37℃下孵育。
5：向各孔中加入10 μl的cck-8溶液d)。
6：37℃下孵育1-4小时e)。
7：测定450 nm处的od值。
a) 使用适当的培养基制备50,000-100,000个/ml的细胞悬液。
b) 建议使用co2培养箱过夜预培养。
c) 使用培养基或pbs来制备溶液。
d) 如果待测溶液有还原性，测定不含细胞，但含有cck-8的待测溶液在450 nm处的空白吸光度。
　如果该吸光度很小，则可以直接加入cck-8，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，
　并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的100 μl培养基和10 μl cck-8进行检测。
e) 白细胞可能需要培养较长时间。

Dojindo,日本同仁化学,CCK-8细胞增殖检测试剂盒

cck8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

检测方法 mtt xtt wst-1 cck8
甲臜产物的水溶性 差（需加有机溶剂溶解再检测） 好 好 好
产品性状 粉末 2 瓶溶液 溶液 1 瓶溶液
使用方法 配成溶液后使用 现配现用 即开即用 即开即用
检测灵敏度 高 很高 很高 高
检测时间 较长 较短 较短 最短
检测波长 560-600nm 420-480nm 420-480nm 430-490nm
细胞毒性 高，细胞形态完全消失 很低，细胞形态不变 很低，细胞形态不变 很低，细胞形态不变
试剂稳定性 一般 较差 一般 很好
批量样品检测 可以 非常适合 非常适合 非常适合
便捷程度 一般 便捷 便捷 非常便捷

Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 利用了Dojindo开发的水溶性四唑盐—WST®-8 (2- (2-甲氧基-4-硝苯基) -3- (4-硝苯 基) -5- (2,4-二磺基苯) -2H-四唑单钠盐)，它在电子载体1-Methoxy PMS存在的情况下能够被还原成水溶性的橙黄色甲臜。 CCK-8溶液可以直接加入到细胞样品中，无需配制。CCK-8法是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的 一种高灵敏度，无放射性的比色检测法。WST®-8被细胞内脱氢酶氧化还原后生成的橙黄色甲臜能够溶解在培养基中 ，生成的甲臜物的数量与活细胞数量成正比。Cell Counting Kit-8是用于化学药物等对细胞增殖或毒性实验时进行细胞计数的试剂盒。试剂盒中使用高灵敏度的新型水溶性四唑盐WST-8甲臜染料作为显色底物，与传统的细胞计数试剂盒相比，灵敏度大幅度的提高。WST-8被细胞内的脱氢酶还原产生水溶性的甲臜染料。通过直接测量甲臜染料（450 nm）的吸光度，即可测出活细胞的数量。细胞数量与甲臜染料成正比关系。同时试剂盒为配置好的1瓶溶液，易于使用。

【3000T】CCK-8细胞增殖毒性检测试剂盒（Cell Counting Kit-8）

 

磁珠,M2452,NHS琼脂糖磁珠试剂盒(10-30μm),BeaverBeads Magrose NHS 试剂盒

货号：M2452
产品简介
浓度 20%(v/v)
英文名称 BeaverBeads Magrose NHS Kit
单位 瓶
规格 1mL

Magrose NHS 表面为 NHS 基团修饰，能够与带有伯胺基团的蛋白和其他分子形成稳 定的肽键，用于亲和纯化抗体、抗原和其他生物分子。与传统的羧基、氨基磁珠相比，表面含 NHS 基 团的磁珠无需事先采用 EDC/NHS 或戊二醛进行活化，只需简单地将含伯氨基的生物配体溶解在试剂盒 自带的 Coupling Buffer 中，室温下将蛋白与 NHS 磁珠混合 1~2 h 便可将生物配体共价偶联到磁珠上， 具有操作简单、偶联条件温和、生物配体偶联快速高效等优点。磁珠偶联过程必需在不含任何氨基的缓 冲溶剂中进行。人工操作时，使用磁性分离架实现磁珠与溶剂分离。也可采用自动化设备操作，自动化 操作适合用于多样品的筛选。

 

产品优势

1.简便，无需活化，可直接与生物配体共价偶联；

2.高效，生物配基偶联效率可达90%以上，大大高于羧基磁珠，同时配基的结合载量更高；

3.快速，1~2h便可完成生物配基偶联；

4.温和，室温或4℃偶联，偶联体系pH为5~9；

5.稳定，形成稳定的酰胺键，防止配基脱落。

6.良好的生物相容性，减少非特异性吸附。

 

备注：
以上数据均来自公开文献, 暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. does not independently validate these methods.
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

磁珠,Mag COOH 系列磁珠,M2131,羧基磁珠(2.8μm),BeaverBeads Mag COOH 280

货号：M2131
产品简介
浓度 10 mg/mL
英文名称 BeaverBeads Mag COOH 280
单位 瓶
规格 5mL 50mL

Mag COOH 系列磁珠具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富羧基官能团、单分散性和 亚微米尺度粒径等特点，能够在特殊化学试剂（如 EDC）的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物 配体共价偶联到微球表面，是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。

Magrose COOH 系列磁珠采用先进的高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料 完美地结合在一起，形成的一种新型功能化磁性微球。与传统磁珠相比，Magrose 具有更快的磁响应 性，同时保持微球良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点等特性，能便捷高效地与多 种生物配体（蛋白、多肽、寡聚核苷酸、药物分子等）进行高载量结合，可作为良好的基础材料进行包 被、吸附、化学改性等后续处理。

 

产品优势

1. 丰富的结合位点，加强与配体的特异性结合。

2. 超顺磁性和高磁响应性，节省操作时间。

3. 良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性。

4. 良好的物理化学稳定性，保障重复性效果。

 

注意事项

1. 冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。

2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。

3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液洗涤磁珠 2~3 次，以去除保存液中乙醇。

4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。

5. 为保证最佳的实验结果，请选用合适的配体进行共价偶联反应。

6. 本产品仅供研究使用。

 

备注：
以上数据均来自公开文献, 暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. does not independently validate these methods.
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

磁珠,链霉亲和素磁珠(5μm),BeaverBeads 链霉亲和素M2423

货号：M2423
产品简介
浓度 10 mg/mL
英文名称 BeaverBeads Streptavidin
单位 瓶
规格 1mL

链霉亲和素-生物素（SA-Biotin）系统具有极高的结合亲和力（Kd=10^-15），在生物领域具有广泛的应用。 Streptavidin 采用蛋白偶联技术将 SA 共价连接于固相载体表面，可高效结合生物素化抗体、核酸、蛋白等配体分子。本产品采用超顺磁性微球，粒径均一、形貌规整，有

利于方便、快捷地捕获目标分子以及实现磁性分离。本产品可配套自动化设备进行高通量操作。

产品优势

1.优秀的生物素分子结合能力

2.良好的稳定性

3.快速灵敏的磁响应性能

4.可适应较为广泛的实验条件

备注：
以上数据均来自公开文献, 暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. does not independently validate these methods.
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

Magrose NH2磁珠,M2170,琼脂糖氨基磁珠(30-150μm),BeaverBeads Magrose NH2

货号：M2170
产品简介
浓度 20%(v/v)
有效期 2年
英文名称 BeaverBeads Magrose NH2
储存条件 2-8℃
单位 瓶
规格 5mL 50mL

Magrose NH2磁珠采用先进的高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料完美地结合在一起，形成的一种新型功能化磁性微球。具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富氨基官能团等特点，能够在特殊化学试剂（如戊二醛）的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物配体共价偶联到微球表面，是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。

 

产品优势

1. 丰富的结合位点，加强与配体的特异性结合。

2. 超顺磁性和高磁响应性，节省操作时间。

3. 良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性。

4. 良好的物理化学稳定性，保障重复性效果。

 

备注：
以上数据均来自公开文献, 暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. does not independently validate these methods.
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

Mag COOH 系列磁珠,Mag COOH羧基磁珠(300nm),BeaverBeads Mag COOH

货号：M2143
产品简介
浓度 10 mg/mL
英文名称 BeaverBeads Mag COOH
单位 瓶
规格 5mL

Mag COOH 系列磁珠具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富羧基官能团、单分散性和 亚微米尺度粒径等特点，能够在特殊化学试剂（如 EDC）的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物 配体共价偶联到微球表面，是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。

Magrose COOH 系列磁珠采用先进的高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料 完美地结合在一起，形成的一种新型功能化磁性微球。与传统磁珠相比，Magrose 具有更快的磁响应 性，同时保持微球良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点等特性，能便捷高效地与多 种生物配体（蛋白、多肽、寡聚核苷酸、药物分子等）进行高载量结合，可作为良好的基础材料进行包 被、吸附、化学改性等后续处理。

产品优势

1. 丰富的结合位点，加强与配体的特异性结合。

2. 超顺磁性和高磁响应性，节省操作时间。

3. 良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性。

4. 良好的物理化学稳定性，保障重复性效果。

注意事项

1. 冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活

性。

2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。

3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液洗涤磁珠 2~3 次，以去除保存液中乙醇。

4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。

5. 为保证最佳的实验结果，请选用合适的配体进行共价偶联反应。

6. 本产品仅供研究使用。

备注：
以上数据均来自公开文献, 暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. does not independently validate these methods.
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

磁珠M2142,Mag COOH羧基磁珠(5μm),Mag COOH 系列磁珠,BeaverBeads Mag COOH

货号：M2142
产品简介
浓度 10 mg/mL
英文名称 BeaverBeads Mag COOH
单位 瓶
规格 5mL

Mag COOH 系列磁珠具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富羧基官能团、单分散性和亚微米尺度粒径等特点，能够在特殊化学试剂（如 EDC）的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物

配体共价偶联到微球表面，是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。

Magrose COOH 系列磁珠采用先进的高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料完美地结合在一起，形成的一种新型功能化磁性微球。与传统磁珠相比，Magrose 具有更快的磁响应

性，同时保持微球良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点等特性，能便捷高效地与多种生物配体（蛋白、多肽、寡聚核苷酸、药物分子等）进行高载量结合，可作为良好的基础材料进行包被、吸附、化学改性等后续处理。

产品优势

1. 丰富的结合位点，加强与配体的特异性结合。

2. 超顺磁性和高磁响应性，节省操作时间。

3. 良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性。

4. 良好的物理化学稳定性，保障重复性效果。

注意事项

1. 冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活

性。

2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。

3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液洗涤磁珠 2~3 次，以去除保存液中乙醇。

4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。

5. 为保证最佳的实验结果，请选用合适的配体进行共价偶联反应。

6. 本产品仅供研究使用。

备注：
以上数据均来自公开文献, 暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. does not independently validate these methods.
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

磁珠M2141,Mag COOH羧基磁珠(1μm),Mag COOH 系列磁珠,BeaverBeads Mag COOH

货号：M2141
产品简介
浓度 10 mg/mL
英文名称 BeaverBeads Mag COOH
单位 瓶
规格 5mL

Mag COOH 系列磁珠具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富羧基官能团、单分散性和 亚微米尺度粒径等特点，能够在特殊化学试剂（如 EDC）的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物 配体共价偶联到微球表面，是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。

Magrose COOH 系列磁珠采用先进的高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料 完美地结合在一起，形成的一种新型功能化磁性微球。与传统磁珠相比，Magrose 具有更快的磁响应 性，同时保持微球良好的分散性、极低的非特异性吸附和更丰富的结合位点等特性，能便捷高效地与多 种生物配体（蛋白、多肽、寡聚核苷酸、药物分子等）进行高载量结合，可作为良好的基础材料进行包 被、吸附、化学改性等后续处理。

产品优势

1. 丰富的结合位点，加强与配体的特异性结合。

2. 超顺磁性和高磁响应性，节省操作时间。

3. 良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性。

4. 良好的物理化学稳定性，保障重复性效果。

注意事项

1. 冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活

性。

2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠呈均匀的悬浮状态。

3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液洗涤磁珠 2~3 次，以去除保存液中乙醇。

4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。

5. 为保证最佳的实验结果，请选用合适的配体进行共价偶联反应。

6. 本产品仅供研究使用。

备注：
以上数据均来自公开文献, 暂未进行独立验证, 仅供参考。
These protocols are for reference only. does not independently validate these methods.
注意：
1.本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。请勿存放于普通住宅区。
2.为了您的安全和健康，请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。
3.实验结果可由多种因素影响，相关处理只限于产品本身，不涉及其他赔偿。

lonza,CC-2703,原代细胞和干细胞,人外周血单个核细胞(hPBMC) CC-2703

Catalog #: CC-2703

Cryopreserved ampule of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells (hPBMC) containing ≥ 100 million cells

Product Overview

Mononuclear cell (MNC) rich cells from leukapheresis are depleted of RBCs and platelets. MNC pools contain, on average, 50% T cells, 20% monocytes, 10% B cells, 10% NK cells and may contain up to 5% granulocytes. Cells are cryopreserved in Lonza cryopreservation media. Count and viability is determined using AO/PI. Cells are collected from healthy donors following IRB protocols.

来自白细胞分离术的富含单核细胞 (MNC) 的细胞耗尽了红细胞和血小板。 MNC 池平均含有 50% 的 T 细胞、20% 的单核细胞、10% 的 B 细胞、10% 的 NK 细胞，并且可能含有高达 5% 的粒细胞。 细胞在 Lonza 冷冻保存培养基中冷冻保存。 使用 AO/PI 确定计数和活力。 按照 IRB 协议从健康供体收集细胞。

Benefits

  • Test negative for mycoplasma, bacteria, yeast, and fungi
  • HIV-1, Hepatitis B and Hepatitis C are not detected for all donors and/or cell lots
  • Certificate of Analysis (CoA) is provided for each cell lot purchased

Applications

  • ELISPOT
  • Proliferation assays
  • Immunogenicity assays
  • Cell therapy process development
  • Humanized mice
  • Biomarker discovery

Content & Storage

Content

1 x Cryopreserved ampule of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells (hPBMC) containing ≥ 100 million cells

Instructions, SDS, CoA

lonza,原代细胞和干细胞,人外周血单个核细胞hPBMC CC-2705

Catalog #: CC-2705

Cryopreserved ampule of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells (hPBMC) containing ≥ 25 million cells

Product Overview

Mononuclear cell (MNC) rich cells from leukapheresis are depleted of RBCs and platelets. MNC pools contain, on average, 50% T cells, 20% monocytes, 10% B cells, 10% NK cells and may contain up to 5% granulocytes. Cells are cryopreserved in Lonza cryopreservation media. Count and viability is determined using AO/PI. Cells are collected from healthy donors following IRB protocols.

来自白细胞分离术的富含单核细胞 (MNC) 的细胞耗尽了红细胞和血小板。 MNC 池平均含有 50% 的 T 细胞、20% 的单核细胞、10% 的 B 细胞、10% 的 NK 细胞，并且可能含有高达 5% 的粒细胞。 细胞在 Lonza 冷冻保存培养基中冷冻保存。 使用 AO/PI 确定计数和活力。 按照 IRB 协议从健康供体收集细胞。

Benefits

  • Test negative for mycoplasma, bacteria, yeast, and fungi
  • HIV-1, Hepatitis B and Hepatitis C are not detected for all donors and/or cell lots
  • Certificate of Analysis (CoA) is provided for each cell lot purchased

Applications

  • ELISPOT
  • Proliferation assays
  • Immunogenicity assays
  • Cell therapy process development
  • Humanized mice
  • Biomarker discovery

Content & Storage

Content

1 x Cryopreserved ampule of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells (hPBMC) containing ≥ 25 million cells

Instructions, SDS, CoA

lonza,原代细胞和干细胞,D-HBE-COPD 患病人支气管/气管上皮细胞B-ALITM 的 COPD

Catalog #: 00195275S

Product Overview

Chronic bronchitis is marked by long-term cough and excess mucous. Emphysema leads to the destruction of the lungs over time. Most people with COPD have a combination of both conditions. Usually COPD is associated with bronchial epithelium changes.

Cryopreserved diseased human bronchial epithelial cells from donors diagnosed with COPD are screened for air liquid interface differentiation. These cells test negative for mycoplasma, bacteria, yeast, and fungi. HIV-1, hepatitis B and hepatitis C are not detected for all donors and/or cell lots. A Certificate of Analysis is provided for each cell lot purchased.

Our catalog number 00195275S are suitable for air-liquid interface studies and are guaranteed to promote full differentiation of the airway epithelium expressed by the formation of a polarized epithelium with good barrier function (transepithelial resistance), secretory phenotype (mucin secretion) and ciliogenesis. Differentiation usually will occur by day 22 in culture.

Benefits

  • All cells test negative for mycoplasma, bacteria, yeast, and fungi
  • HIV-1, Hepatitis B and Hepatitis C are not detected for all donors and/or cell lots
  • Certificate of Analysis provided for every cell lot

 

Content & Storage

Content

1 x Cryopreserved ampule containing ≥ 500,000 cells

Instructions, SDS, CoA
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NHBE – Human Bronchial/Tracheal Epithelial Cells for B-ALITM Culture CC-2540S

NHBE – 用于 B-ALITM 培养的人支气管/气管上皮细胞 CC-2540S

D-HBE-COPD – Diseased Human Bronchial/Tracheal Epithelial Cells – COPD for B-ALITM   This product is no longer available for sale.
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Dojindo,氨基-EG6-十六烷基硫醇盐酸盐/10/A505

 Product Description

聚乙二醇 (PEG) 广泛用于材料改性以提高表面的亲水性。 PEG 涂层材料通常在生理条件下更稳定。 由于氨基-EG6-十一硫醇具有6个乙二醇单元，11个碳原子，末端有一个SH基团，可用于在金表面制备高度取向和亲水的SAM。 由于提高了亲水性，这适用于表面上的生物材料标记。 亲水表面可以防止蛋白质或其他生物材料发生非特异性结合。 因此，该试剂制备的SAM将为开发生物材料传感器或DNA/蛋白质微阵列提供更好的表面。 为了在金表面上制备氨基-EG6-SAM，羟基-EGn-十一硫醇（n = 3, 6）用于根据引入到表面上的分子的密度来稀释氨基的数量。

How to Prepare SAM

1. 将镀金玻璃板在食人鱼溶液 a) 中浸泡 10-15 分钟。 用纯净水清洗板。a)2。 将氨基烷硫醇化合物溶解在乙醇中，制备数 mM 至数十 mM 溶液。 3． 将板浸泡在氨基烷硫醇溶液中一段时间。b)4。 用乙醇和水清洗 SAM 涂层板。 5． 如有必要，在氮气气氛下干燥板。

a)食人鱼溶液：硫酸和30%过氧化氢，3:1。 食人鱼溶液是一种强氧化剂。 使用时需要格外小心。 不要将食人鱼溶液涂在树脂涂层板上； 它可能会腐蚀树脂。b) 要制备性能最佳的 SAM 涂层板，应单独确定氨基烷硫醇浓度和浸泡时间。

Application of SAM-Preparation of DNA Array (Fig. 1)

1. 使用涂有 5 nm 铬和 45 nm 金薄膜的 SF10 载玻片（Schott Glass Technologies）。 2．将载玻片浸泡在 1 mM 1-十八烷硫醇 (ODT)/乙醇溶液中过夜，以制备 ODT SAM 涂层幻灯片。3。通过使用 Hg-Xe 弧光灯的紫外线照射在 ODT SAM 涂层幻灯片上绘制 500 μm x 500 μm 图案。a)4。将幻灯片浸泡在 1 mM 11-氨基-1-十一烷硫醇 (AUT)/乙醇溶液中 2 小时，在 500 μm x 500 μm 光图案区域上形成 AUT SAM。5。将 2 mM SPDP 溶液 b) 滴到载玻片上，并将载玻片置于室温下。6。清洗载玻片并在氮气气氛下干燥。 7．将 1 mM 硫醇-DNA 溶液 c) 涂抹到每个 500 μm x 500 μm 图案上，并在室温下孵育过夜。 8.将载玻片与样品溶液一起孵育 10 分钟，然后用磷酸盐缓冲液洗涤，然后进行 SPR 成像。

a)辐照时间：1-1.5小时b)SPDP：N-琥珀酰亚胺3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯。将 SPDP 溶解在 DMSO 中以制备 50 mM 溶液。用 100 mM 三乙醇胺缓冲液，pH 7.0 稀释 25 倍。c) 用 100 mM 三乙醇胺缓冲液，pH 8.0 溶解硫醇-DNA。

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
了解检测机制的差异： 点击这里
细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

Dojindo,同仁化学,ExoSparkler 外泌体蛋白标记试剂盒Deep,EX04

Product Description

外泌体是细胞外囊泡 (EV) 的一种形式，可能导致癌症的恶性转化和转移。 因此，通过外泌体进行的细胞间通讯引起了科学界的极大兴趣。 为了阐明这种交流，已经使用了基于荧光染料的标记技术。 标记细胞膜的荧光染料通常用于外泌体标记，因为外泌体中的脂质双层是合适的标记目标。 ExoSparkler 系列可用于对纯化的外泌体膜或蛋白质进行染色，从而可以对细胞摄取的标记外泌体进行成像。

我们的 ExoSparkler 外泌体蛋白标记试剂盒提供从荧光标记到纯化的所有功能ExoSparkler 系列包含可用于去除荧光标记后未反应的染料的过滤管，以及用于标记外泌体的优化方案。 我们的 ExoSparkler 系列可以使用简单的程序制备外泌体的荧光标记。

ExoSparkler series product comparison

实验条件通过超速离心（10μg外泌体蛋白）纯化外泌体并用每种染料染色。 将标记的外泌体添加到 HeLa 细胞（1.25×104 个细胞）中，培养细胞 24 小时。 洗涤细胞，并观察显示标记外泌体的免疫荧光图像。检测条件绿色：Ex 488nm/Em 490-540nm红色：Ex 561nm/Em 570-640nm深红色：Ex 640nm/Em 640-760nm

外泌体的定位 将用 ExoSparkler Exosome Protein Labeling Kit-Deep Red（Item#: EX06, Protein Dye-Deep Red）或 ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red（item#: EX02, Mem Dye-Red）染色的外泌体添加到 HeLa 细胞中， 并用溶酶体染色试剂（绿色）对细胞进行共染色。

实验条件通过超速离心（5μg外泌体蛋白）纯化外泌体并用每种染料染色。 将标记的外泌体添加到 HeLa 细胞（0.75×104 个细胞）中，培养细胞 3.5 小时。 之后，用溶酶体染色试剂（绿色）对细胞进行染色。 洗涤细胞，并观察显示标记外泌体的免疫荧光图像。

检测条件Protein Dye-Deep Red（紫色）：Ex 640nm/Em 640-760nmMemDye-Red（红色）：Ex 561nm/Em 570-640nmLysosome sing reagent（绿色）。 : Ex 488nm/Em 490-540nm

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
了解检测机制的差异： 点击这里
细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

同仁化学,羟基-EG6-十六烷基硫醇/10/H396

Product Description

聚乙二醇 (PEG) 广泛用于材料改性以提高表面的亲水性。 PEG 涂层材料通常在生理条件下更稳定。 由于羟基-EGn-十一硫醇具有3或6个乙二醇单元，11个碳原子，末端有一个SH基团，因此可用于在金表面制备高度取向和亲水的SAM，适合在表面进行生物材料标记 . 这是由于亲水性的提高。 亲水表面可以防止蛋白质或其他生物材料发生非特异性结合。 因此，该试剂制备的SAM将为开发生物材料传感器或DNA/蛋白质微阵列提供更好的表面。 羟基-EGn-十一硫醇（n = 3, 6）用于根据引入到表面上的分子的密度来稀释羧基-SAM或氨基-SAM。 有几篇关于标记蛋白质（如卵清蛋白和细胞色素 C）的论文。

References for Aminoalkanetihiol4. C. Pale-Grosdemange, E. S. Simon, K. L. Prime, and G. M. Whitesides, Anal. Chem., 1999, 71, 777.5. A. Subramanian, J. Irudayaraj, and T. Ryan, Biosensors and Bioelectronics, 2006, 21, 998.6. X. Qian, S. J. Metallo, I. S. Choi, H. Wu, M. N. Liang and G. M. Whitesides, Anal. Chem., 2002, 74, 1805.7. M. Kyo, K.Usui-Aoki, H. Koga, Anal. Chem, 2005, 77, 7115.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
了解检测机制的差异： 点击这里
细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

Dojindo,细胞计数试剂盒-8和#038,细胞毒性LDH检测试剂盒WST/LDH/CLS05

DescriptionReferencesManual

细胞增殖或细胞毒性的多通道评估很重要。 这对于仔细检查它们和详细的细胞增殖或细胞毒性作用至关重要。细胞增殖通过 WST-8 测定和 Brdu 测定进行评估； 在本报告中，通过 LDH 测定、WST-8 测定和台盼蓝排除检查了细胞的细胞毒性。 查看更多使用 LDH 测定、WST-8 测定和原代培养肝细胞中 ATP 含量的测量值，Fujimoto 等人。 据报道，SOD2 敲除小鼠可用作肝损伤或线粒体毒性的动物模型。

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
了解检测机制的差异： 点击这里
细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

Dojindo,FOPA/100/F329,膦酸衍生物同样在金属氧化物上形成SAM

Product Description

膦酸衍生物用于氧化金属的表面改性，如 Al2O31)、TiO22)、ZrO23)、SiO24)、Mica5)、不锈钢(SS316L)6)、镍钛诺7)、羟基磷灰石8)、AgO9)、ZnO10)、ITO11、12 ). 长期以来，有机硅烷一直被用于在金属氧化物上形成自组装单层 (SAM)。然而，由于试剂之间的稳定性和聚合性差，在应用中并不总是适用。另一方面，膦酸衍生物同样在金属氧化物上形成SAM，尽管它们是非常稳定的化合物。此外，据报道，膦酸衍生物使用形成比有机硅烷更稳定和致密的 SAM。克劳克等。人。和 Sekitani 等。人。显示 Al2O3 上的烷基膦酸酯 SAM 比三氯硅烷衍生物 SAM 作为有机晶体管的导体膜更有用13)。Sharma 等。人。已经报道了通过氧等离子体处理或用含有全氟烷基的膦酸（FOPA）修饰ITO衬底来增加ITO衬底的功函数。然而，提高的功函数水平在 FOPA 改性衬底上保持 246 小时，而在氧等离子体处理的衬底上功函数立即降低 11)。此外，使用具有 FOPA 的改性 TO 制造的有机薄膜太阳能电池提高了光强度、驱动电压和寿命的稳定性。有三种不同烷基长度的全氟膦酸可供选择。

1) T. Hauffman, O. Blajiev, J. Snauwaert, C. van Haesendonck, A. Hubin, H. Terryn,  EStudy of the self-assembling of n-octylphosphonic acid layers on aluminum oxide E Langmuir, 2008, 24 (23), 13450.2) B. M. Silverman, K. A. Wieghaus, J. Schwartz, “Comparative properties of siloxane vs phosphonate monolayers on a key titanium alloy E Langmuir, 2005, 21(1), 225.3) W. Gao, L. Reven, “Solid-state NMR-studies of self-assembled monolayers E Langmuir 1995, 11 (6), 1860.4) E. L. Hanson, J. Schwartz, B. Nickel, N. Koch, M. F. Danisman, “Bonding self-assembled, compact organophosphonate monolayers to the native oxide surface of silicon E J. Am. Chem. Soc. 2003, 125 (51), 16074.5)J. T. Woodward, A. Ulman, D. K. Schwartz, “Self-assembled monolayer growth of octadecylphosphonic acid on mica E Langmuir 1996, 12 (15), 3626.6)A. Raman, M. Dubey, I. Gouzman and E. S. Gawalt, “Formation of self-assembled monolayers of alkylphosphonic acid on the netive oxide surface of SS316L E Langmuir, 2006, 22, 6469.7) R. Quinones and E. S. Gawalt, “Polystyrene formation on monolayer-modified nitinol effectively controls corrosion E Langmuir, 2008, 24, 10858.8) S. C. D’Andrea and Al. Y. Fadeev, “Covalent surface modification of calcium hydroxyapatite using n-alkyl- and n-fluoroalkylphosphonic acids EB>, Langmuir, 2003, 19, 7904.9) Y. T. Tao, C. Y. Huang, D. R. Chiou, L. J. Chens, “Infrared and atomic force microscopy imaging study of the reorganization of self-assembled monolayers of carboxylic acids on silver surface E Langmuir, 2002, 18, 8400.10) B. Zhang, T. Kong, W. Xu, R. Su, Y. Gao and G. Cheng, “Surface functionalization of zinc oxide by carboxyalkylphosphonic acid self-assembled monolayers E Langmuir, 2010, 26(6), 4514.11) A. Sharma, B. Kippelen, P. J. Hotchkiss and S. R. Marder, “Stabilization of the work function of indium tin oxide using organic surface modifiers in organic light-emitting diodes E Appl. Phys. Lett., 2008, 93, 163308.12) A. Pulsipher, N. P. Westcott, W. Luo, and M. N. Yousaf, “Rapid in situ generation of two patterned chemoselective surface chemistries from a single hydroxy-terminated surface using controlled microfluidic oxidation E J. Am. Chem. Soc., 2009, 131(22), 762613) a) H. Klauk, U. Zschieschang, J. Pflaum, M. Halik,  E/SPAN>Ultralow-power organic complementary circuits E Nature, 2007, 445, 745. b) T. Sekitani, Y. Noguchi, U. Zschieschang, H. Klauk, T. Someya, “Organic transistors manufactured using inkjet technology with subfemtoliter accuracy E Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 2008, 105, 4976

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

Dojindo,ADPS/1/OC02

Oxidation Reaction

1. K. Tamaoku, et al., New water-soluble Hydrogen Donors for the Enzymatic Photometric Determination of Hydrogen Peroxide. II. N-Ethyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)aniline derivatives. Chem Pharm Bull. 1982;30:2492-2497.2. K. Tamaoku, et al., New water-soluble Hydrogen Donors for the Enzymatic Spectrophotometric Determination of Hydrogen Peroxide. Anal Chim Acta. 1982;136:121-127.3. B. C. Madsen, et al., Flow Injection and Photometric Determination of Hydrogen Peroxide in Rainwater with N-Ethyl-N-(sulfopropyl)aniline sodium salt. Anal Chem. 1984;56:2849-2850.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

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细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
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-WST 96孔有机硅定向剂
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Dojindo,IgG纯化试剂盒-A/1/AP01

DescriptionDataQ & AManualS.D.S

Product Description

IgG 纯化试剂盒用于山羊、小鼠、兔和其他动物的免疫球蛋白 G 的分离和纯化。该试剂盒包含固定的蛋白 A 或 G 和缓冲溶液，可最大限度地回收 IgG。从血清或其他含有 IgG 的溶液中分离和纯化 IgG 的总时间约为 30 分钟（图 1）。由于蛋白 A 或 G 的支持物是硅胶，离心后凝胶上保留溶液的体积非常小。因此，所有不与蛋白A结合的蛋白质或其他物质都可以通过洗涤两次来去除。图 2 显示了来自各种动物的纯化 IgG 的 SDS-PAGE。此外，在洗脱过程中 IgG 的变性是最小的，因为与凝胶结合的 IgG 会以非常快的过程释放。本试剂盒中的凝胶可重复使用 20 次以上，性能相同。使用过的凝胶在 0-5ºC 的洗涤缓冲液中也可稳定保存一年。 1 IgG分离过程

图 2 使用 IgG PurificationPurification Kit-A 和 Kit-G.WS 分离的免疫球蛋白的 SDS-PAGE缓冲

PrecautionIf the IgG solution contains gelatin,before applying the solution to the kit, enzyme digestion may be required.

Table 1 IgG Recovery from 50 μl Serum

What is the recovery of IgG with this kit?

It depends on the type of IgG and type of animal. In the case of high affinity type IgG for protein A or protein G, about 70-80% IgG is recovered from 100-200 μg IgG or IgG solution containing other proteins or macromolecules.

How is the purity of purified IgG using this kit?

The purity of the IgG from various serum is indicated in the figure above. Highly purified IgG is available with only a one time purification process.

How much IgG can be recovered from serum?

About 150-350 μg IgG can be recovered from 50 μl serum. I-7. Protein Labeling: IgG purification

How many times can a protein A gel be used?

At least 20 times.

Can I use the used protein A gel or protein G gel for the purification of different IgG solutions?

Use a new gel for a different sample to avoid contamination.

Is a used protein A gel or protein G gel stable?

A used protein A gel or protein G gel in Washing buffer is stable at 0-5ºC for one year.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

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Dojindo,DTPA酸酐/5/D033

Product Description of Amine-Reactive Biotins
DTPA 酸酐用于向具有胺基的分子或表面添加螯合功能。 添加螯合功能后，可以将金属离子如放射性同位素引入分子中。 根据 Hnatowich 博士的说法，IgG 可以使用 DTPA 酸酐用放射性铟进行标记。 DTPA 首先通过共价键与 IgG 连接，然后 In(III) 与 DTPA 紧密螯合。 已知此类放射性抗体在体外和体内与抗原结合。
Structural Formula:

1. W. C. Eckelman, S. M. Karesh and R. C. Reba, New Compounds: Fatty Acid and Long Chain Hydrocarbon Derivatives Containing a Strong Chelating Agent, J. Pharm. Sci., 1975, 64, 704.2. B. A. Khaw, J. T. Fallon, H. W. Strauss and E. Haber, Myocardial Infarct Imaging of Antibodies to Canine Cardiac Myosin with Indium-111-Diethylenetriamine pentaacetic acid, Science, 1980, 209, 295.3. D. J. Hnatowich, W. W. Layne and R. L. Childs, The Preparation and Labeling of DTPA-Coupled Albumin, J. Appl. Radiat. Isot., 1982, 33, 327.4. D. J. Hnatowich, W. W. Layne, R. L. Childs, D. Lanteigne, M. A. Davis, T. W. Griffin and P. W. Doherty, Radioactive Labeling of Antibody: A Simple and Efficient Method, Science, 1983, 220, 613.5. C. F. Meares and D. A. Goodwin, Linking Radiometals to Proteins with Bifunctional Chelating Agents, J. Protein Chem. , 1984, 3, 215.6. A. Canfi, M. P. Bailey and B. F. Rocks, Fluorescent Terbium Chelates Derived from Diethylenetriaminepentaacetic Acid and Heterocyclic Compounds, Analyst, 1989, 114, 1405.7. C. H. Paik, K. Yokoyama, J. C. Reynolds, S. M. Quadri, C. Y. Min, S. Y. Shin, P. J. Maloney, S. M. Larson and R. C. Reba, Reduction of Background Activities by Introduction of a Diester Linkage between Antibody and a Chelatein Radioimmunodetection of Tumor, J. Nuclear Medicine, 1989, 30, 1693.8. D. J. Hnatowich, Recent Developments in the Radiolabeling of Antibodies with iodine, Indium, and Technetium, Semi. Nucl. Medicine, 1990, 20, 80.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

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细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
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Dojindo,Liperflou/50/L248,Liperfluo 是一种含有低聚氧乙烯的苝衍生物

Product Description

Liperfluo 是一种含有低聚氧乙烯的苝衍生物，由 Dojindo 设计和独家开发，用于检测脂质过氧化物。 Liperfluo 通过在乙醇等有机溶剂中的脂质过氧化物特异性氧化发出强烈的荧光。在检测活性氧 (ROS) 的荧光探针中，Liperfluo 是唯一可以特异性检测脂质过氧化物的化合物。由于氧化的 Liperfluo 的激发和发射波长分别为 524 nm 和 535 nm，因此可以最大限度地减少样品的光损伤和自发荧光。与二异喹啉环一端相连的四甘醇基团有助于其在水性缓冲液中的溶解性和分散性。 Liperfluo 的氧化形式在水性介质中几乎不发荧光，并在细胞膜等亲脂部位发出强荧光。因此，它可以很容易地通过荧光显微镜和活细胞的流式细胞术分析应用于脂质过氧化物成像。 Liperfluo 用于监测铁死亡研究中的脂质过氧化。

 

Procedure1. Innoculate SH-SY5Y cells(6.0 x 105 cells/well) to a 6-well plate.2. Incubate the plate at 37 ºC for overnight.3. Add Liperfluo, DMSO solution (final conc. 20 μM) and incubate at37 ºC for 15 min.4. Add either Cumene Hydroperoxide (final conc. 100 μM) or AIPH*(final conc. 6 mM).5. Incubate at 37 ºC for 2 hours.6. Observe fluorescent by microscope**.* AIPH: 2,2 Eazobis-[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride** Olympus IX-71 epifluorescent microscope, mirror unit: U-MNIBA3, exposure time: 10 sec, ISO: 800

Data was kindly provided from Dr. N. Noguchi, Doshisha University, System Life Science Laboratory.

Flow cytometric analysis of lipid hydroperoxides in live cell

Procedure1. Innoculate SH-SY5Y cells (6.0 x 105 cells/well) to a 6-well plate.2. Incubate the plate at 37 ºC for overnight.3. Add Liperfluo, DMSO solution (final conc. 20 μM) and incubate at 37 ºC for 15 min.4. Add either Cumene Hydroperoxide (final conc. 100 μM) or AIPH*(final conc. 6 mM).5. Incubate at 37 ºC for 2 hours.6. Wash cells with PBS.7. Collect cells with PBA and analyse by flow cytometer**.* AIPH: 2,2 Eazobis-[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]dihydrochloride** BD FACSAriaTM I

Data was kindly provided from Dr. N. Noguchi, Doshisha University, System Life Science Laboratory.

Lipid peroxide of living cellsCell line: L929Microscope: Zeiss LSM510METAFilter type: FITC（GFP, Alexa488）wide filterHFT UV/488NFT490BP505-550

Procedure:1. Prepare cell suspension (2.5 x 105 cell/well) in 35mm Glass bottom dish and incubate at 37oC overnight in CO2.2. Discard the media and add new media containing Liperfluo (final conc. 1μM) .3. Incubate at 37oC for 30 min in CO2.4. Discard the media add new media containing t-BHP (final conc. 250μM ).5. Incubate at 37oC for 2 hours in CO2.6. Observe using confocal microscope.Data was kindly provided from Dr. T. Kumagai and Dr. H. Imai, Kitasato University, School of Pharmacy.

坏死、凋亡和自噬被称为细胞死亡相关过程。 2012 年，Ferroptosis 被提出为新的细胞死亡之一。 铁死亡被研究为由铁离子依赖性过氧化脂质的积累引起的非凋亡性细胞死亡。 Liperfluo用作荧光证明，可以直接检测细胞内过氧化脂质。

Ferroptosis: A Regulated Cell Death Nexus Linking Metabolism, Redox Biology, and Disease.B. R. Stockwell et al., Cell, 2017, 171(2), 273.

Oxidized Arachidonic/Adrenic Phosphatidylethanolamines Navigate Cells to FerroptosisV. E. Kagan et al., Nat. Chem. Biol., 2017, 13, (1), 81.

[Related Products]

 

1. K. Yamanaka, Y. Saito, J. Sakiyama, Y. Ohuchi, F. Oseto and N. Noguchi, “A Novel Fluorescent Probe with High Sensitivity and Selective Detection of Lipid Hydroperoxides in Cells”, RSC Adv., 2012, 2, (20), 7894.2. V. E. Kagan, G. W. Mao, F. Qu, J. P. F. Angeli, S. Doll, C. S. Croix, H. H. Dar, B. Liu, V. A. Tyurin, V. B. Ritov, A. A. Kapralov, A. A. Amoscato, J. Jiang, T. Anthonymuthu, D. Mohammadyani, Q. Yang, B. Proneth, J. K. Seetharaman, S. Watkins, I. Bahar, J. Greenberger, R. K. Mallampalli, B. R. Stockwell, Y. Y. Tyurina, M. Conrad and H. Bayır, “Oxidized arachidonic and adrenic PEs navigate cells to ferroptosis”, Nature Chemical Biology., 2017, 13, (1), 81.3. Y. Nakashima, S. Ohta, A. M. Wolf, “Blue light-induced oxidative stress in live skin.”, Free Radical Biology and Medicine., 2017, 108, 300.4. M. Tsugita, N. Morimoto and M. Nakayama, “SiO2 and TiO2 nanoparticles synergistically trigger macrophage inflammatory responses”, Particle and Fibre Toxicology., 2017, DOI 10.1186/s12989-017-0192-6.5. K. Iuchi, A. Imoto, N. Kamimura, K. Nishimaki, H. Ichimiya, T. Yokota and S. Ohta, “Molecular hydrogen regulates gene expression by modifying the free radical chain reactiondependent generation of oxidized phospholipid mediators”, Scientific Reports., 2016, DOI: 10.1038/srep18971.6. A. J. Clark, and H. R. Petty., “WO3/Pt nanoparticles promote light-induced lipid peroxidation and lysosomal instability within tumor cells.”, Nanotechnology., 2016, 27, (7), 075103.7. T. Otani, M. Matsuda, A. Mizokami, N. Kitagawa, H. Takeuchi, E. Jimi, T. Inai and M. Hirata, “Osteocalcin triggers Fas/FasL-mediated necroptosis in adipocytes via activation of p300”, Cell Death Dis., 2018, 9, 1194.8. H.H. Dar, Y.Y. Tyurina, K. Mikulska-Ruminska, I. Shrivastava, H.C. Ting, V.A. Tyurin, J. Krieger, C.M. St Croix, S. Watkins, E. Bayir, G. Mao, C. Ambruster, A. Kapralov, H. Wang, M.H. Parsek, T.S. Anthonymuthu, A.F. Ogunsola, B.A. Flitter, C.J. Freedman, J.R. Gaston, T.R. Holman, J.M. Pilewski, J.S. Greenberger, R.K. Mallampalli, Y. Doi, J.S. Lee, I. Bahar, J.M. Bomberger, H. Bayır, V.E. Kagan. “Pseudomonas aeruginosa utilizes host polyunsaturated phosphatidylethanolamines to trigger theft-ferroptosis in bronchial epithelium.” The journal of Clinical Investigation. 2018, DOI: 10.1172/JCI99490.9. H. Alborzinia, T. I. Ignashkova, F. R. Dejure, M. Gendarme, J. Theobald, S. Wolfl, R. K. Lindemann and J. H. Reiling , “Golgi stress mediates redox imbalance and ferroptosis in human cells”, Commun Biol.., 2018, 1, (210), DOI: 10.1038/s42003-018-0212-6.10. W. Wang, M. Green, J. E. Choi, M. Gijon, P. D. Kennedy, J. K. Johnson, P. Liao, X. Lang, I. Kryczek, A. Sell, H. Xia, J. Zhou, G. Li, J. Li, W. Li, S. Wei, L. Vatan, H. Zhang, W. Szeliga , W. Gu, R. Liu, T. S. Lawrence, C. Lamb, Y. Tanno, M. Cieslik, E. Stone, G. Georgiou, T. A. Chan, A. Chinnaiyan, W. Zou, “CD8+ T cells regulate tumour ferroptosis during cancer immunotherapy.”, Nature., 2019, 569, (7755), 270.11. M. Gao, J. Deng, F. Liu, A. Fan, Y. Wang, H. Wu, D. Ding, D. Kong, Z. Wang, D. Peer, Y. Zhao, ‘Triggered ferroptotic polymer micelles for reversing multidrug resistance to chemotherapy’, Biomaterials., 2019, 233, 119486.12. N. Wang, GZ. Zeng, JL. Yin, ZX. Bian, Artesunate activates the ATF4-CHOP-CHAC1 pathway and affects ferroptosis in Burkitt’s Lymphoma, Biochem. Biophys. Res. Commun., 2019, 519, (3), 533-539.13. T.Tsukui, Takayuki Tsukui, Z. Chen, H. Fuda, T. Furukawa, K. Oura, T. Sakurai, S. Hui, H. Chiba, ‘Novel Fluorescence-Based Method To Characterize the Antioxidative Effects of Food Metabolites on Lipid Droplets in Cultured Hepatocytes’, J. Agric. Food Chem., 2019, 67, (35), 9934-9941.

14. Kapralov, A.A., Yang, Q., Dar, H.H. et al. Redox lipid reprogramming commands susceptibility of macrophages and microglia to ferroptotic death. Nat Chem Biol 16, 278–290 (2020).

15. H. Bayir et al. Achieving Life Through Death: Redox Biology of Lipid Peroxidation in Ferroptosis, Cell Chem Biol., 2020 Apr 7;S2451-9456(20)30111-2

 

Which excitation filter or laser should I use for fluorescent microscope or flow cytometry?
Fluorescent microscope: GFP filter (ex. 450 – 490nm, em. 500 – 545nm)FITC filter (ex. 467 – 498nm, em. 513 – 556nm)Flow Cytometry: ex. 488nm
Does phenol red or serum affect detection?
No, phenol red or serum will not affect detection. However, if there is high background, please use PBS instead.
For high background or low fluorescence, is there anything I can do for improvement?
If the background is high, Liperfluo may be oxidized by light. Please avoid light during incubation by covering the solution with aluminum foil.Increasing reaction time because of weak fluorescence will NOT improve the result due to increasing the background. Therefore, please adjust the device setting by following: increase the excitation light strength or exposure time.

Can Liperfluo be used on both suspended and adjacent cells? Fixed Cells?
Yes, Liperfluo can be used on both suspended and adjacent cells.We have data for HL-60 (suspended cells), CHO and SH-SY5Y (adjacent cells).Liperfluo can NOT be used on fixed cells.
Can I store Liperfluo (DMSO) solution?
No, Liperfluo in DMSO solution can NOT be stored due to instability of Liperfluo in light. After preparing the solution, please avoid light by using aluminum foil and use it within that day.
What is recommended concentration of Liperfluo?
For cell staining, we recommend concentration between 1 to 10 μM and DMSO concentration lower than 1%.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

Dojindo,间谍LHP/1/S343

Product Description
Spy-LHP 是一种新开发的用于过氧化磷脂活细胞成像的荧光探针。脂质过氧化物有多种检测方法，如碘滴定法、比色法或化学发光法测定丙二醛或 4-羟基壬烯醛。丙二醛和 4-羟基壬烯醛是通过用活性氧物质氧化制备的脂质氢过氧化物的衍生物。硫代巴比妥酸和 1-Methyl-2-phenylindole 用于衍生丙二醛，用于比色或荧光分析。
Spy-LHP 是一种低荧光化合物，但被脂质过氧化氢氧化成为高荧光化合物，如图 1 所示。类似的产品 DPPP 被脂质过氧化氢氧化并成为可激发的荧光化合物在 352 nm 处发射 380 nm 处的荧光。然而，DPPP 的紫外激发显着损害了活细胞。由于氧化的 Spy-LHP 在 524 nm 激发时会发出最大波长为 535 nm 的强荧光（量子产率：~1），因此对活细胞的损伤非常小。 Spy-LHP 具有两条烷基链以提高对脂质双层的亲和力。 Spy-LHP 对脂质氢过氧化物具有高度选择性，不会与过氧化氢、羟基自由基、超氧阴离子、一氧化氮、过氧亚硝酸盐和烷基过氧自由基发生反应。

Fig. 1 Reaction of Spy-LHP with lipid hydroperoxide

1. N. Soh, et al., Novel fluorescent probe for detecting hydroperoxides with strong emission in the visible range. Bioorg Med Chem Lett. 2006;16:2943-2946.2. N. Soh, et al., Swallow-tailed perylene derivative: a new tool for fluorescent imaging of lipid hydroperoxides. Org Biomol Chem. 2007;5:3762-3768.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

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-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

Dojindo,PlasMem鲜红色/100/P505

Detection Principle

质膜 (PM) 由将细胞内环境与细胞外空间隔开的脂质双层组成。 因此，PM 在许多细胞行为中起着核心作用，例如细胞迁移、细胞伸展和信号级联。 此外，PM功能障碍是一个重要的生物标志物，因为它与细胞状态有关，并与许多疾病有关。

Dojindo 的 PlasMem Bright 染料克服了这些限制。 PlasMem Bright 染料设计用于染色 PM 超过一天。 此外，与其他市售染料相比，PlasMem Bright 染料更易溶于水，并且可以用培养基稀释。 PlasMem Bright 染料提供两种不同的颜色选择（绿色和红色），并作为即用型 DMSO 溶液提供。 使用生长培养基或 HBSS 通过单一稀释步骤即可轻松制备工作溶液。

For more information on PlasMem Bright Dyes, please refer to the publication below:Takahashi, M. et al., “Amphipathic Fluorescent Dyes for Sensitive and Long-Term Monitoring of Plasma Membranes“ bioRxiv, 2020, doi: https://doi.org/10.1101/2020.11.16.379206

 

The general number of usable assays per 100 ul35 mm dish x 10μ-Slide 8 well x 10

Low toxicity, No washing, and High retentivity

High retentivity on plasma membrane

HeLa cells stained with each plasma membrane staining reagent were incubated for 24 hrs and each the resulting fluorescent image was compared. PlasMem Bright series had higher retentivity on plasma membrane than other products.

 

Clear visualization of plasma membrane

Observe morphology of neuron (differentiated SH-SY5Y cells) and localization of mitochondria in axon.

Experimental Example: Mitochondrial detection in neuroblast (SH-SY5Y cells)

The neuroblasts SH-SY5Y cells were stained with PlasMem Bright Green (green), MitoBright LT Red (red) and Hoechst 33342 (blue), and 3D images were obtained with a confocal fluorescence microscope.

 

<Detection Condition>Plasma Membrane (PlasMem Bright Green, green): Ex. 488 nm / Em. 500 – 560 nmMitochondria (MitoBright LT Red, red): Ex. 561 nm / Em. 560 – 620 nmNuclear (Hoechst 33342, blue): Ex. 405 nm / Em. 400 – 450 nm

<Protocol>(1) Wash SH-SY5Y cells with HBSS(2) Add PlasMem Bright Green (diluted 200 times), Hoechst 33342 (final concentration: 5 µg / ml) and MitoBright LT Red (final concentration: 0.1 µmol / l) prepared in the medium.(3) Incubate for 10 minutes(4) Wash the cells twice with HBSS(5) Observation with a fluorescence microscope

<Detection conditions>Plasma Membrane (PlasMem Bright Green, green): Ex. 488 nm / Em. 500 –560 nmExosome (ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red, red): Ex. 561 nm / Em. 560 –620 nm

<Protocol>(1) HeLa cells and incubate for 24 hours(2) Remove the supernatant and add PlasMem Bright Green (100-fold dilution) prepared in the medium.(3) Incubate for 10 minutes(4) Wash the cells 3 times with HBSS(5) Add 175 μl of MEM medium and 25 ul of Exosome solution stained with ExoSparkler Exosome Membrane Labeling Kit-Red.(6) Incubate overnight in a CO2 incubator(For immobilization) Wash cells twice with HBSS, add 4% PFA, incubate for 15 minutes, then wash cells twice with HBSS(7) Observed with a confocal laser scanning microscope

Experimental example: Time-lapse imaging of brain-derived mouse neuroblastoma (N1E-115 cells)

Time-lapse imaging of N1E-115 cells stained with PlasMem Bright Green diluted 200-fold in medium for 30 min.

 

<Detection conditions>・ Cells: N1E-115 cells (brain-derived mouse neuroblastoma)・ Medium: 5% FBS, 1% glutamine-containing D-MEM (Low-glucose)・ Culture equipment: 35 mm glass bottom dish・ Imaging equipment: Fluorescence microscope with incubator・ Shooting time: 1 hour, shooting interval: 2 minutes

Data was kindly provided from Dr. K Fukui, Shibaura Institute of Technology.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

Dojindo,Bacstain-细菌活力检测试剂盒-CTC/DAPI/1/BS09

Detection Principle

-Bacstain-细菌活力检测试剂盒是用于细菌荧光双染的系列产品。通过组合不同类型的荧光染料，可以获得每个指标（膜损伤、呼吸活性和酯酶活性）的染色图像。细菌活力通常通过营养琼脂培养基中的菌落形成来评估。然而，这需要很长的培养时间，并且很难识别有活力但不可培养 (VNC) 的细菌的生长。然而，荧光染色不需要细菌培养，并且可以通过快速和简单的协议进行活力评估。

-Bacstain- 细菌活力检测试剂盒 – CTC/DAPI 以细菌的呼吸活动为指标。 CTC 在被细菌呼吸活动形成的 NAD(P)H 还原后产生甲臜染料，因此选择性地染色活性细菌。 DAPI 是一种特异于 DNA 的 AT 序列的小沟结合剂，可渗透到细菌中以染色核酸，无论膜是否受损。因此，该试剂盒可用于测量具有呼吸活性的细菌与总细菌的比例，用于分析每个污渍的荧光图像。

Quantitative analysis

-Bacstain- Bacterial Viability Detection Kit – DAPI/PI (BS08) and –CTC/DAPI (BS09) were used to evaluate the effect of benzalkonium chloride on S. aureus (Gram-positive bacteria) by fluorescent imaging. The images were quantified by ImageJ and show the correlation with drug concentration.The results showed that the effects of benzalkonium chloride on the respiratory activity and membrane damage of S. aureus varied greatly depending on the indicator detected.The evaluation of multiple indicators will contribute to improving the reliability of drug efficacy measurements by providing a multidimensional view of the activity of the bacterium that would be missed by a single indicator.

Related Product Information

Product Size Product Code
-Bacstain- CFDA solution 100 assays BS03
-Bacstain- DAPI solution 100 assays BS04
-Bacstain- AO solution 100 assays BS05
-Bacstain- PI solution 100 assays BS07
-Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Flow cytometry) 100 assays BS01
-Bacstain- CTC Rapid Staining Kit (for Microscopy) 100 assays BS02

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
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Dojindo,G6PD 检测试剂盒-WST/500/G256

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 (G6PD) 缺乏是最常见的人类酶缺陷之一。 患有这种疾病的人可能会出现由伯氨喹、抗疟疾药物、羟氯喹*等药物引起的溶血性贫血。 Dojindo 的 G6PD 检测试剂盒-WST 使用水溶性四唑盐 WST-8，可在 460 nm 处产生具有强烈橙色的水溶性甲臜。 全血样本中的 G6PD 活性可以通过颜色强度直观地监测。 该试剂盒实现了一种非常简单和快速的 G6PD 活性筛查方法。

*The kit is for research use only.

*Please click this link regarding Hydroxychloroquine.

Principle and data

1) A. Jalloh, I. S. Tantular, S. Pusarawati, A. P. Kawilarang, H. Kerong, K. Lin, M. U. Ferreira, H. Matsuoka, M. Arai, K. Kita and F. Kawamoto, “Rapid Epidemiologic Assessment of Glucose-6-phosphate Dehydrogenase Deficiency in Malaria-endemic Areas in Southeast Asia Using a Novel Diagnostic kit”, Trop. Med. Int. Health, 2004, 9(5), 615.

2) I. S. Tantular, K. Iwai, K. Lin, S. Basuki, T. Horie, H. H. Htay, H. Matsuoka, H. Marwoto, C. Wongsrichanalai, Y. P. Dachlan, S. Kojima, A. Ishii and F. Kawamoto, “Field Trials of a Rapid Test for G6PD Deficiency in Combination with a Rapid Diagnosis of Malaria”, Trop. Med. Int. Health, 1999, 4, 245.

3) A. Ishii, H. Asahi and S.Kawabata, “Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Deficiency in Solomon Islands”, Jpn. J. Parasitol., 1994, 43, 312.

4) E. Beutler, “A Series of New Screening Procedures for Pyruvate Kinase Deficiency, Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Deficiency, and Glutathione Reductase”, Blood, 1966, 28, 553.

5) E. Beutler and M. Mitchell, “Special Modification of the Fluorescent Screening Method for Glucose-6-Phosphate Dehydrogenase Deficiency”, Blood, 1968, 32, 816.

6) H. Fujii, K. Takahashi and S. Miwa, “A New Simple Screening Method for Glucose 6-Phosphate Dehydrogenase Deficiency”, Acta Haematologica Japonica, 1984, 47, 185.

7) A. Hirono, H. Fujii and S. Miwa, “An Improved Single-step Screening Method for Glucose-6-phosphate Dehydrogenase Deficiency”, Jpn. J. Trop. Med. Hyg., 1998, 26, 1.

8) A. Pujades, M. Lewis, A. M. Salvati, S. Miwa, H. Fujii, R. Zarza, R. Alvarez, E. Rull and J. -L. V. Corrons, “Evaluation of the Blue Formazan Spot Test for Screening Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase Deficiency”, Int. J. Hematol., 1999, 69, 234.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
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Dojindo,1-甲氧基PES/50/M470,1-Methoxy PES 是一种电子介体

DescriptionDataS.D.S

Product Description

1-Methoxy PES 是一种电子介体，比 1-Methoxy PMS(M003) 具有更高的溶液稳定性。 使用 1-甲氧基 PES 极大地提高了中性至碱性条件下的稳定性。 1-甲氧基PES是一种稳定的小分子化合物，它具有与心肌黄酶相同或更高的热稳定性。 1-甲氧基 PES 溶液可以长期储存。

Characteristics of Each Electron Mediator

Stable in Wide Range of pH – Comparison with 1-Methox PMS

方法：将WST-8和NADH混合到电子介质溶液中，在30 oC保存30天后，通过比色法测定电子介质的残留活性。

结果：1-甲氧基PMS溶液在pH6及以上时稳定性急剧下降，而1-甲氧基PES溶液直到pH8才稳定。

Solution Stability Compared to Diaphorase

方法：工作溶液：1mmol/l WST-850 mmol/l HEPES 缓冲液 (pH7.0)1% Triton X-1001-甲氧基 PES（终浓度为 2 umol/l）或心肌黄酶（终浓度为 0.05 U/ml） 与工作溶液混合。 将 100 ul 的 200 umol/l NADH (50 mmol/l HEPES 缓冲液 pH7.0) 添加到 100 ul 每种电子介体溶液中。 在 37 oC 下 20 分钟后，读取 WST 甲臜的吸光度（450nm）。 将新制备的溶液和在 5oC 下储存 45 天的溶液用于残留活性比较。

结果：心肌黄酶的残留活性在储存45天后下降了20%，而1-甲氧基PES显示出与新鲜制备的溶液相似的残留活性。

Cell Proliferation / Cytotoxicity Redox Dyes

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
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Dojindo,细胞染色-细胞红溶液/1/C410

DescriptionApplicationReferencesDataS.D.S

Product Description

CytoRed 具有细胞膜渗透性，并在活细胞内以试卤灵的形式积聚（图 1）。 CytoRed 的光谱比 BCECF 或 Calcein 宽得多，因此也可以使用荧光素和罗丹明过滤器。 试卤灵的激发和发射波长分别为 560 nm 和 590 nm。 用 CytoRed 染色的细胞照片如图 2 所示。

Staining Procedure1.Prepare 1 mM CytoRed solution with DMSO. Dilute it to prepare 10 μM CytoRed solution with culture medium or an appropriate buffer.a)2.Prepare a 1×105-1×106 cells/ml cell suspension and culture the cells in a chamber slide.3.Remove culture medium and wash cells with culture medium (PBS-Hanks medium, etc).4.Add CytoRed solution to the cells, and incubate the chamber at 37ºC for 30 min to 1 hour.5.Remove the culture medium from cells and add new medium.b)6.Wash cells twice with PBS or an appropriate buffer.7.Observe the cells under a fluorescence microscope with 560 nm excitation and 590 nm emission filters.

a) Incubate the MitoRed buffer solution at 37ºC prior to adding to cells.b) For fixing after washing cells, add 10% formarin buffer and incubate for 15-20 min, and then wash with PBS.

1. M. Ishiyama, et al., A Resorufin Derivative as a Fluorogenic Indicator for Cell Viability. Anal Sci. 1999;15:1025-1028.

 

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
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Dojindo,DSP/1/D629,DSP是一种使氨基相互反应的交联剂

DescriptionApplicationReferencesS.D.S
Product Description:DSP是一种使氨基相互反应的交联剂。 由于DSP分子两端具有N-羟基琥珀酰亚胺活性酯，可选择性地与氨基反应，因此可以将载体蛋白与简单的半抗原或制备标记酶结合。 BS3 采用具有烷基链到接头部分的化学结构。 同时，DTSSP 和 DSP 能够切割容易被还原剂还原的引入二硫键的接头位点。 此外，由于具有磺酸基的活性酯基被引入到DTSSP和BS3中，因此可以在不使用有机溶剂如DMSO或DMF的情况下进行标记反应。

Homo-bifunctional Reagents

Product Name Code Length (Å) Solvent
DSP D629 8.5 DMSO, DMF
SPDP S291 4.1 Acetonitrile

1. P. F. Pilch and M. P.Czech, “Interaction of Cross-linking Agents with the Insulin EffectorSystem of Isolated Fat Cells”, J. Biol. Chem., 1979, 254(9),3375.2. M. A. Gosselin, W. Guo and R. J. Lee, “Efficient Gene Transfer UsingReversibly Cross-linked Low Molecular Weight Polyethylenimine”, BioconjugateChem., 2001, 12, 989.3. M. A. Gosselin, W. Guo and R. J. Lee, “Incorporation of ReversiblyCross-linked Polyplexes into LPDII Vectors for Gene Delivery”, BioconjugateChem., 2002, 13, 1044.4. P.-Y. Zeng, C. R. Vakoc, Z.-C. Chen, G. A. Blobel and S. L. Berger, “Invivo dual Cross-linking for Identification of Indirect DNA-AssociatedProteins by Chromatin Immunoprecipitation”, BioTechniques, 2006,41(6), 694.5. S. Santra, C. Kaittanis, O. J. Santiesteban and J. M. Perez,”Cell-Specific, Activatable, and Theranostic Prodrug for Dual-TargetedCancer Imaging and Therapy”, J. Am. Chem. Soc., 2011, 133,16680.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
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Dojindo,SulfoBiotics – 生物素-HPDP(WS) 溶液/500/SB17

Product Description
Biotin-HPDP(WS) 是一种新型水溶性生物素标记试剂，由 Biotin-HPDP（产品代码：B573）改性而成。 Biotin-HPDP 是一种通过可逆二硫键将生物素部分引入蛋白质巯基的常规试剂。 该试剂可用于通过使用亲和素包被的珠子对生物素化蛋白质进行亲和纯化，因为二硫键可被还原剂裂解（图 1）。 因此，生物素-HPDP 已广泛用于生物素开关测定，这是一种用于蛋白质硫醇修饰（如 s-亚硝基化、s-硫化和 s-棕榈酰化）的分析技术。 然而，由于在水中的低溶解度，甚至在 DMSO 和 DMF 中，溶液的制备非常耗时。 因此，开发了Biotin-HPDP(WS)溶液以提高Biotin-HPDP的溶解度。-SulfoBiotics-Biotin-HPDP(WS)溶液是一种易于使用的水溶液，含有20mmol/l Biotin-HPDP(WS)。

Figure 1 Schematic Protocol for Biotin Labeling with Biotin-HPDP(WS) and Purifiation of the Biotinylated Protein

GAPDH 的生物素标记和抗生物素蛋白珠的回收 -< 程序 >1。将溶解缓冲液（35 μl）和溶解缓冲液（5μl）中的 100 mmol/l DTT 加入到 1.5 ml 微管中的 10 μl 1 mg/ml GAPDH 的 PBS 溶液中，并涡旋混合。 2． 37℃孵育30分钟后，将溶液全部转移至10K过滤管中，12000转离心10分钟。 3．向过滤管中加入PBS（50 μl），12,000 rpm离心10分钟。 4．重复第 3 步。 5．将RIPA缓冲液(126 μl)和4 mmol/l Biotin-HPDP(WS)的H2O溶液(14 μl)加入过滤管中，通过移液管与蛋白质混合。 6．滤管37℃保温1小时，12000转/分离心10分钟。 7．向试管中加入 PBS（50 μl），并以 12,000 rpm 的转速离心 10 分钟。 8．重复步骤7。 9．向管中加入中和缓冲液(400 μl)，通过移液管溶解生物素标记的蛋白质，并将溶液转移至1.5 ml-microtube。 10．将步骤 9 的溶液 (50 μl) 添加到试管中的 NeutravidinTM 琼脂糖珠中。 ※ Neutravidin琼脂糖珠在反应前用中和缓冲液洗涤。 11．将溶液在4℃温育1小时。12．将试管以 2,500 rpm 的速度离心 1 分钟，然后使用移液管去除上清液。13。向试管中加入中和缓冲液（+600 mmol/l NaCl）（1 ml）并以 2,500 rpm 的速度离心 1 分钟，然后使用移液器除去上清液。 14．步骤 13 重复两次。 15．将中和缓冲液 (1 ml) 添加到试管中并以 2,500 rpm 离心 1 分钟，然后使用移液器除去上清液。16。重复第 15 步。 17．向试管中加入洗脱缓冲液 (50 μl)，涡旋混合。将溶液在4℃温育1小时。18．将试管以 2,500 rpm 离心 1 分钟，将 10 μl 上清液转移到 1.5 ml 微管中。19。将加载缓冲液 (2 μl) 添加到微管中，并将溶液应用于 SDS-PAGE（CBB 染色）和蛋白质印迹。

Figure 2 Detection of recovered GAPDHComparison between Biotin-HPDP and Biotin-HPDP (WS)

1. S. R. Jaffrey and Solomon H. Snyder, “The Biotin Switch Method for the Detection of S-Nitrosylated Proteins “, Sci. STKE, 2001, 86, pl1.2. X. Wang, N. Kettenhofen, S. Shiva, N. Hogg, and M. Gladwin, “Copper dependence of the biotin switch assay : modified assay for measuring cellular and blood nitrosated proteins”, Free Radic. Biol. Med., 2008, 44, 1362.3. M. T. Forrester, M. W. Foster, M. Benhar, and J. S. Stamler, “Detection of Protein S-Nitrosylation with the Biotin Switch Technique”, Free Radic. Biol. Med., 2009, 46(2), 119.4. M. D. Kornberg, N. Sen, M. R. Hara, K. R. Juluri, J. V. K. Nguyen, A. M. Snowman, L. Law, L. D. Hester, and S. H. Snyder, “GAPDH Mediates Nitrosylation of Nuclear Proteins”, Nat. Cell Biol., 2010, 12(11), 1094.5. J. Wan, A. F. Roth, A. O. Bailey, and N. G. Davis, “Palmitoylated proteins: purifi cation and identification”, Nat. Protoc., 2007, 1573. 6) A. K. Mustafa, M. M. Gadalla, N. Sen, S. Kim, W. Mu, S. K. Gazi, R.K. Barrow, G. Yang, R. Wang, and S. H. Snyder, “H2S Signals Through Protein S-Sulfhydration”, Sci. Signal., 2009, 2(96), ra72.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
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Dojindo,生物膜形成检测试剂盒/100/B601

生物膜是由微生物和细胞外多糖组成的生物聚集体，可以存在于许多环境中。 生物膜中的微生物对抗生素具有很强的抗药性； 因此，对具有抗生物膜活性的药物和食品成分的研究是一个不断发展的领域。我们的检测试剂盒用于定量测量生物膜形成/抑制生物膜形成（Biofilm Formation Assay Kit）和抗生物膜药物功效（Biofilm Viability Assay Kit) 采用了一种协议，该协议旨在使用来自生物膜形成的钉板。 我们的检测试剂盒将所有必要的成分组合到每个包装中。

Feature 1: Measurement time can be significantly shortened.In existing methods, biofilms are formed on the bottom of the well of a microplate, and additional work is required to change microbial culture media and wash sample several times before and after staining. However, our assay kits allow you to form biofilms on the pegs attached to the plate’s lid. Media change and staining process can be done simply by transferring the lid; therefore, our assay kits are very easy to use.

Feature 2: Our assay kits can reduce measurement variation.In existing methods, biofilm formation occurs on the bottom of the well of a microplate, which made biofilm easier to peel off because of the processes such as washing. This causes measurement variation, and this measurement variation was an issue for the quantification of biofilm. Our assay kits allow you to form biofilms on the pegs attached to the plate’s lid and make it possible to avoid peeling off biofilm which occurs during the process of the formation.

Two different types of assay kits for different purposes.We offer two types of assay kits that measure the amount of biofilm formation or the metabolic activities of live microorganisms within biofilms by using the same measurement method. You can select the one that best suits your needs.

Selection of 2 types of assay kits

*Conditions on biofilm formation vary according to microbial species and strains. When you need to examine these conditions, we first recommend you use the Biofilm Formation Assay Kit.*The Biofilm Formation Assay Kit is a product developed together with Fukuoka Industrial Technology Center.

Procedure

Example of measurementIndicators for drug-mediated inhibition of biofilm formation or antimicrobial effect of biofilms include MBIC (minimum biofilm inhibitory concentrations) and MBEC (minimum biofilm eradication concentrations). MBIC and MBEC of S. aureus were measured using each kit.

[How to use – Quick Tutorial]
Q1. How can I examine the conditions on biofilm formation?

A1. Test items for conditions on biofilm formation include types of culture media, seeding density of microorganisms, frequency of media changes, incubation time, incubation temperature, and others.We show examples of optimizing the following test items: types of culture media, seeding density of microorganisms, frequency of media changes, and incubation time, as below.If you optimize incubation temperature, it is necessary to use a number of the Biofilm Formation Assay Kits (Product code: B601).Measure the amount of biofilm formation – ①Under the following optimized conditions: types of culture media, seeding density of microorganisms, and media changes, the amount of biofilm formation can be confirmed by the experiments shown below.

Example of plate arrangement

Experimental schedule

Procedure(Step 1) Day 1: 96-well plate ①In accordance with the reference layout shown above, fill each well (rows A and B) of the 96-well plate with 180μl of microbial cell suspension with concentrations ① and ② made in culture media A through D.Leave the wells (rows C through H) blank. Place a 96-peg lid on the 96-well plate and incubate the plate at the optimum growth temperature for the microorganism for 24 hours.※ ExamplesMicrobial concentrations ① and ②: Approximately 107 CFU/ml and 106 CFU/ml, respectively.(Step 2) Day 2: 96-well ②In accordance with the reference layout shown above, fill each well (rows A and B) of the 96-well plate with 180μl of culture media without microorganism.Fill each well (rows C and D) of the same 96-well plate with 180μl of microbial cell suspension with concentrations ① and ② made in culture media A through D. Leave the wells (rows E through H) blank.Place the 96-peg lid (Step1) on the 96-well plate ② and incubate the 96-well plate ② at the optimum growth temperature for the microorganism for 24 hours.(Step 3) Day 3: 96-well plate ③In accordance with the reference layout shown above, fill each well (rows A through D) of the 96-well plate with 180μl of culture media without microorganism.Fill each well (rows E and F) of the same 96-well plate with 180 μl of microbial cell suspension with concentrations ① and ② made in culture media A through D. Leave the wells (rows G and H) blank.Place the 96-peg lid (Step1) on the 96-well plate ③ and incubate the 96-well plate at the optimum growth temperature for the microorganism for 24 hours.(Step 4) Day 4: 96-well plate ④In accordance with the reference layout shown above, fill each well (rows A through F) of the 96-well plate with 180μl of culture media without microorganism.Fill each well (rows G and H) of the same 96-well plate with 180μl of microbial cell suspension with concentrations ① and ② made in culture media A through D.Place the 96-peg lid (Step1) on the 96-well plate ④ and incubate the 96-well plate ④ at the optimum growth temperature for the microorganism for 24 hours.(Step5) Perform experiments using a new 96-well plate, in accordance with Steps 2 through 6 which describe the measurements of biofilm formation/inhibition of biofilm formation in the technical manual.Measure the amount of biofilm formation – ②Under the following optimized conditions: types of culture media, seeding density of microorganisms, and media changes, the amount of biofilm formation can be confirmed by the experiments shown below.

Example of plate arrangement

Experimental schedule

Procedure(Step 1) Day 1: 96-well plate○1In accordance with the reference layout shown above, fill each well (rows A and B) of the 96-well plate with 180μl of microbial cell suspension with concentrations ① and ② made in culture media A through D.Leave the wells (rows C through H) blank.Place a 96-peg lid on the 96-well plate and incubate the plate at the optimum growth temperature for the microorganism for 24 hours.※ ExamplesMicrobial concentrations ① and ②: Approximately 107 CFU/ml and 106 CFU/ml, respectively.(Step2) Day 2: Remove the 96-peg lid. Allow cells to grow in the rows A and B of the 96-well plate○1 without changing the culture medium.Fill each well (rows C and D) of the same 96-well plate with 180μl of microbial cell suspension with concentrations ① and ② made in culture media A through D. Leave the wells (rows E through H) blank.Place the 96-peg lid back to the 96-well plate ①. Continuously incubate the 96-well plate ① at the optimum growth temperature for the microorganism for 24 hours.(Step3) Day 3: Remove the 96-peg lid. Allow cells to grow in the rows (A through D) of the 96-well plate ①without changing the culture medium.Fill each well (rows E and F) of the same 96-well plate with 180μl of microbial cell suspension with concentrations ① and ② made in culture media A through D. Leave the wells (rows G and H) blank. Place the 96-peg lid back to the 96-well plate ①. Continuously incubate the 96-well plate ① at the optimum growth temperature for the microorganism for 24 hours.(Step 4) Day 4: Remove the 96-peg lid. Allow cells to grow in the rows (A through F) of the 96-well plate ① without changing the culture medium.Fill each well (rows G and H) of the same 96-well plate with 180 μl of microbial cell suspension with concentrations ① and ② made in culture media A through D. Leave the wells (rows G and H) blank. Place the 96-peg lid back to the 96-well plate ①. Continuously incubate the 96-well plate ① at the optimum growth temperature for the microorganism for 24 hours.(Step 5): Perform experiments using a new 96-well plate, in accordance with Steps 2 through 6 which describe the measurements of biofilm formation/inhibition of biofilm formation in the technical manual.

Q2. What types of microbial species have been tested?

A2. Dojindo Laboratories has evaluated the following microbial species that formed biofilms using the Biofilm Formation Assay Kit (this product) and the Biofilm Viability Assay Kit (Product code: B603).– Staphylococcus aureus– Pseudomonas aeruginosa– Escherichia coli– Streptococcus mutans– Porphyromonas gingivalisPlease refer to the technical manual, in terms of culture conditions for the above microbial species, experimental examples, etc.

Q3. When I evaluate inhibition of biofilm formation and anti-biofilm drug efficacy, what is the approximate amount of biofilm formation required for experiment?

A3. In the Biofilm Formation Assay Kit (Product code: B601), please consider the amount of biofilm formation as a rough indication when a value of absorbance (590 nm) for crystal violet solution obtained after the final step is greater than 0.5.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
MTT
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细胞周期分析 细胞周期测定溶液深红色
细胞周期测定溶液蓝色

 

Dojindo,羧基PTIO/10/C348

Product Description

Carboxy-PTIO 是一种稳定的水溶性有机自由基，可与 NO 反应形成 NO2·此反应可通过电子自旋共振 (ESR) 进行监测。 NO 是一种不稳定的分子，在生物系统中的代谢具有复杂的级联反应。快速产生的 NO 相关代谢物进行各种生理活动。常用的NO清除剂如血红蛋白捕集剂NO；它们还捕获 NOS 抑制剂，例如精氨酸衍生物。这些 NO 清除剂还同时淬灭所有其他与 NO 相关的代谢物。相比之下，Carboxy-PTIO 不会显着影响其他与 NO 相关的产品系统，因为它将 NO 转化为 NO2，NO2 是 NO 的代谢产物。因此，Carboxy-PTIO 可用于研究 NO 与其下游代谢物分开的影响。 Akaike 博士和其他人表明，Carboxy-PTIO 抑制由乙酰胆碱诱导的大鼠主动脉环松弛，其效果是 NG-硝基精氨酸的两倍。 Yoshida 博士和其他人报告说，通过 Carboxy-PTIO 处理产生的 NO 下游代谢物与单独使用 NO 相比具有更高的抗病毒活性。 NO代谢物在生物系统中发挥重要作用；因此，应与 NO 分开调查。

Reaction of NO quenching

1. E. F. Ullman, et al., Studies of Stable Free Radicals. X. Nitronyl Nitroxide Monoradicals and Biradicals as Possible Small Molecule Spin Labels. J Am Chem Soc. 1972;94:7049-7059.2. Y. Miura, et al., Polymers Containing Stable Free Raficals, 5. Preparation of a Polymer Containing Imidazoline 3-Oxide 1-Oxyl Groups. Macromol Chem Phys. 1973;172:233-236.3. K. Inoue, et al., Magnetic Properties of the Crystals of p-(1-Oxyl-3-Oxide-4, 4, 5, 5-Tetramethyl-2-Imidazolin-2-Yl)Benzoic acid and Its Alkali Metal Salts. Chem Phys Lett. 1993;207:551-555.4. T. Akaike, et al., Antagonistic Action of Imidazolineoxyl N-Oxides Against Endothelium-Derived Relaxing Factor/NO Through a Radical Reaction. Biochemistry. 1993;32:827-832.5. J. Joseph, et al., Trapping of Nitric Oxide by Nitronyl Nitroxides: an Electron Spin Resonance Investigation. Biochem Biophys Res Commun. 1993;192:926-934.6. M. Yoshida, et al., Therapeutic Effects of Imidazolineoxyl N-Oxide Against Endotoxin Shock Through Its Direct Nitric Oxide-scavenging Activity. Biochem Biophys Res Commun. 1994;202:923-930.7. T. Az-Ma, et al., Reaction Between Imidazolineoxil N-Oxide(Carboxy-PTIO) and Nitric Oxide Released from Cultured Endothelial Cells:Quantitative Measurement of Nitric Oxide by ESR Spectrometry. Life Sci. 1994;54:PL185-PL190.8. H. Maeda, et al., Multiple Functions of Nitric Oxide in Pathophysiology and Microbiology: Analysis by a New Nitric Oxide Scavenger. J Leukoc Biol. 1994;56:588-592.9. T. Akaike, et al., Quantitation of Nitric Oxide Using 2-Phenyl-4, 4, 5, 5-Tetramethylimidazoline-1-Oxyl 3-Oxide(PTIO). Methods Enzymol. 1996;268:211-221.10. S. Satoh, et al., NO Donors Stimulate Noradrenaline Release from Rat Hippocampus in a Calmodulin-dependent Manner in the Presence of LCysteine. J Cell Physiol. 1996;169:87-96.11. D. C. Hooper, et al., Prevention of Experimental Allergic Encephalomyelitis by Targeting Nitric Oxide and Peroxynitrite: Implications for the Treatment of Multiple Sclerosis. PNAS. 1997;94:2528-2533.12. S. Pfeiffer, et al., Interference of carboxy-PTIO with Nitric-Oxide and Peroxynitrite-Mediated Reactions. Free Radic Biol Med. 1997;22:787-794.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
-WST 96孔有机硅定向剂
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Dojindo,8-二茂铁基-1-辛硫醇/100/F247

Product Description of Ferrocenyl Alkanethiols

二茂铁烷基硫醇用于修饰金表面以引入电化学活性分子。修饰的金表面可用于开发灵敏的电化学分析。 Rubin 和其他人在金电极表面制造了具有不同链长的氨基烷硫醇和二茂铁烷硫醇的混合 SAM。他们将葡萄糖氧化酶固定在氨基烷硫醇位点上，并使用二茂铁基-烷硫醇位点作为电子介质。他们报告了混合 SAM 的电响应和链长之间的关系。 Uosaki 及其同事使用傅里叶变换红外反射吸附光谱 (FT-IRRAS) 和电化学石英晶体报告了 11-二茂铁基-1-十一烷硫醇 SAM 在金电极上的氧化还原反应过程中结构变化和吸收的二茂铁烷硫醇数量的结果微量天平（EQCM）方法。他们提出了在二茂铁部分的氧化还原反应期间单层的取向变化的可能性。他们还使用伏安图和椭偏仪估计了这种变化。

1. M. D. Porter, T. B. Bright, D. L. Allara and C. E. D. Chidsey, Spontaneously Organized Molecular Assemblies.4.Structural Characterization of n-Alkyl Thiol Monolayers on Gold by Optical Ellipsometry, Infrared Spectroscopy, and Electrochemistry, J. Am. Chem. Soc., 1987, 109, 3559.2. C. E. D. Chidsey, C. R. Bertozzi, T. M. Putvinski and A. M. Mujsce, Coadsorption of Ferrocene-Terminated and Unsubstituted Alkanethiols on Gold: Electroactive Self-Assembled Monolayers, J. Am. Chem. Soc., 1990, 112, 4301.3. J. J. Hickman, D. Ofer, P. E. Laibinis, G. M. Whitesides and M. S. Wrighton, Molecular Self-Assembly of Two-Terminal, Voltammetric Microsensors with Internal references, Science, 1991, 252, 688.4. C. E. D. Chidsey, C. R. Bertozzi, T. M. Putvinski and A. M. Mujsce, Coadsorption of Ferrocene-Terminated and Unsubstituted Alkanethiols on Gold:Electroactive Self-Assembled Monolayers, Chemtracts, 1991, 3, 27.5. K. Uosaki, Y. Sato and H. Kita, Electrochemical Characteristics of a Gold Electrode Modified with a Self-Assembled Monolayer of Ferrocenylalkanethiols, Langmuir, 1991, 7, 1510.6. Y. Kajiya, T. Okamoto and H. Yoneyama, Glucose Sensitivity of Thiol-modified Gold Electrodes Having Immobilized Glucose Oxidase and 2-Aminoethylferrocene, Chem. Lett., 1993, 2107.7. T. Ohtsuka, Y. Sato and K. Uosaki, Dynamic Ellipsometry of a Self-Assembled Monolayer of a Ferrocenylalkanethiol during Oxidation-Reduction Cycles, Langmuir, 1994, 10, 3658.8. K. Shimazu, I. Yagi, Y. Sato and K. Uosaki, Electrochemical Quartz Crystal Microbalance Studies of Self-Assembled Monolayers of 11-ferrocenyl-1-undecanethiol: Structure-dependent Ion-pairing and Solvent Uptake, J. Electroanal. Chem., 1994, 372, 117.9. T. Kondo, M. Takechi, Y. Sato and K. Uosaki, Absorption Behavior of Functionalized Ferrocenylalkane Thiol and Disulfide onto Au and ITO and Electrochemical Properties of Modified Electrodes: Effects of Acyl and Alkyl Groups Attached to the Ferrocene Ring, J. Electroanal. Chem., 1995, 381, 203.10. J. l. Anderson, E. F. Bowden and P. G. Pickup, Dynamic Electrochemistry : Methodology and Application E Anal. Chem., 1996, 68, 379R.11. K. Chen, F. Xu and C. A. Mirkin, Do Alkanethiols Adsorb onto the Surfaces of Tl-Ba-Ca-Cu-O-Based High-Temperature Superconductors? The Critical Role of H2O Contact on the Adsorption Process, Langmuir, 1996, 12, 2622.12. S. Rubin, G. Bar, R. W. Cutts, J. T. Chow, J. P. Ferraris and T. A. Zawodzinski Jr., Electrical Communication Between Glucose Oxidase and Different Ferrocenylalkanethiol Chain Lengths, Mat. Res. Soc. Symp. Proc., 1996, 413, 377.13. R. C. Sabapathy, S. Bhattacharyya, W. E. Cleland Jr. and C. L. Hussey, Host-Guest Complexation in Self-Assembled Monolayers: Inclusion of a Monolayer-Anchored Cationic Ferrocene-Based Guest by Cyclodextrin Hosts, Langmuir, 1998, 14, 3797.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
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lonza ,lonza CC-2704,原代细胞和干细胞,人外周血单个核细胞(hPBMC)

Catalog #: CC-2704

Cryopreserved ampule of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells (hPBMC) containing ≥ 10 million cells

Product Overview

来自白细胞分离术的富含单核细胞 (MNC) 的细胞耗尽了红细胞和血小板。 MNC 池平均含有 50% 的 T 细胞、20% 的单核细胞、10% 的 B 细胞、10% 的 NK 细胞，并且可能含有高达 5% 的粒细胞。 细胞在 Lonza 冷冻保存培养基中冷冻保存。 使用 AO/PI 确定计数和活力。 按照 IRB 协议从健康供体收集细胞。

Benefits

  • Test negative for mycoplasma, bacteria, yeast, and fungi
  • HIV-1, Hepatitis B and Hepatitis C are not detected for all donors and/or cell lots
  • Certificate of Analysis (CoA) is provided for each cell lot purchased

Applications

  • ELISPOT
  • Proliferation assays
  • Immunogenicity assays
  • Cell therapy process development
  • Humanized mice
  • Biomarker discovery

Content & Storage

Content

1 x Cryopreserved ampule of Human Peripheral Blood Mononuclear Cells (hPBMC) containing ≥ 10 million cells

Dojindo,IC3-OSu special packaging/20/I271

Product Description

IC3 和 IC5 是吲哚菁染料，可与蛋白质、肽和胺修饰寡核苷酸上的胺基反应。 因为IC3和IC5在其结构中都没有磺酸基团，所以分子的水溶性非常低。 溶解该化合物需要有机溶剂。 由于水溶性差，用这些化合物过度标记蛋白质可能会使标记的蛋白质从水溶液中沉淀出来。 然而，由于没有给蛋白质添加负电荷，修饰蛋白质的总电荷数在用这些化合物标记之前和之后是相同的。 IC 染料包包含 100 μg 染料。 根据下游实验的目的，这个量足以修饰 1-2 mg 或更多的蛋白质。

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
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Dojindo,过氧化物酶标记试剂盒SH/3/LK09

DescriptionReferencesDataQ & AManualS.D.S

Product Description

过氧化物酶标记试剂盒-SH 主要用于制备过氧化物酶标记的 IgG 用于酶免疫测定 (EIA) 和制备过氧化物酶标记的抗原用于竞争性 EIA。 SH 反应性过氧化物酶是该试剂盒的一个组成部分，可与蛋白质或其他分子的硫醇基团发生反应（图 1）。 该试剂盒包含标记过程所需的所有试剂，包括还原剂和储存缓冲液。 SH反应性过氧化物酶与靶分子形成共价键。 还原剂可以在 IgG 分子中产生游离硫醇基团。 当过氧化物酶标记的 IgG 用于 EIA 时，SH 反应性过氧化物酶的标记效率足够高，无需任何标记后纯化过程。如果标记后需要高纯度偶联物，只需使用亲和柱或凝胶渗透柱 . 标记小分子时，可以使用该套件中包含的过滤管去除多余的分子。

Fig. 1 IgG labeling reaction of SH-reactive peroxidase

Precaution♦ The molecular weight of the reduced protein to be labeled with this kit should be greater than 50,000.♦ The molecular weight of the small thiol compound to be labeled with this kit should be smaller than 5,000.♦ IgG or peroxidase-conjugated IgG is always on the membrane of the filtration tube during the labeling process.♦ If the IgG solution contains other proteins with molecular weight larger than 10,000, such as BSA or gelatin, purify the IgG solution prior to labeling peroxidase with this kit. IgG solution can be purified by IgG Purification Kits (not included in this kit).♦ If the IgG solution contains small insoluble materials, centrifuge the solution and use the supernatant for the labeling.

1. K. Inoue, A. Sugiyama, P. C. Reid, Y. Ito, K. Miyauchi, S. Mukai, M. Sagara, K. Miyamoto, H. Satoh, I. Kohno, T. Kurata, H. Ota, A. Mantovani, T. Hamakubo, H. Daida and T. Kodama, “Establishment of a High Sensitivity Plasma Assay for Human Pentraxin3 as a Marker for Unstable Angina Pectoris”, Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2007, 27, 161.2. N. Esaki, Y. Ohkawa, N. Hashimoto, Y. Tsuda, Y. Ohmi, R. H. Bhuiyan, N. Kotani, K. Honke, A. Enomoto, M. Takahashi, K. Furukawa, and K. Furukawa, “ASC amino acid transporter 2, defined by enzyme-mediated activation of radical sources, enhances malignancy of GD2-positive small-cell lung cancer.”, Cancer Sci.., 2018, 109, (1), 141.3. G.W.Zhanga, S.J.Lai, Y.Yoshimura, and N.Isobe, “Messenger RNA expression and immunolocalization of psoriasin in the goat mammary gland and its milk concentration after an intramammary infusion of lipopolysaccharide”, Vet. J.., 2014, 202, (1), 89.4. G-W. Zhang, S-J. Lai, Y. Yoshimura, and N. Isobe, “Expression of cathelicidins mRNA in the goat mammary gland and effect of the intramammary infusion of lipopolysaccharide on milk cathelicidin-2 concentration”, Vet. Microbiol.., 2014, 170, (1-2), 125.5. H. Tateno, S. Saito, K. Hiemori, K. Kiyoi, K. Hasehira, M. Toyoda, Y. Onuma, Y. Ito, H. Akutsu, and J. Hirabayashi, “α2–6 sialylation is a marker of the differentiation potential of human mesenchymal stem cells”, Glycobiology., 2016, 26, (12), 1328.6. K. Iizumi, H. Kawasaki, A. Shigenaga, M. Tominaga, A. Otsu, A. Kamo, Y. Kamata, K. Takamori, and F. Yamakura, “Tryptophan nitration of immunoglobulin light chain as a new possible biomarker for atopic dermatitis”, J Clin Biochem Nutr., 2018, 63, (3), 197.7. K. Morioka, K. Fukai, K. Yoshida, R. Yamazoe, H. Onozato, S. Ohashi, T. Tsuda, and K. Sakamoto, “Foot-and-Mouth Disease Virus Antigen Detection Enzyme-Linked Immunosorbent Assay Using Multiserotype-Reactive Monoclonal Antibodies”, J. Clin. Microbiol.., 2009, 47, (11), 3663.8. M. Watanabe, I. Takemasa, N. Kaneko, Y. Yokoyama, E. Matsuo, S. Iwasa, M. Mori, N. Matsuura, M. Monden, and O. Nishimura, “Clinical significance of circulating galectins as colorectal cancer markers”, Oncol. Rep.., 2011, 25, (5), 1217.9. M. Yasunaga, S. Saijou, S. Hanaoka, T. Anzai, R. Tsumura, and Y. Matsumura, “Significant antitumor effect of an antibody against TMEM180, a new colorectal cancer‐specific molecule”, Cancer Sci.., 2019, 110, (2), 761.10. N. Esaki, Y. Ohkawa, N. Hashimoto, Y. Tsuda, Y. Ohmi, R. H. Bhuiyan, N. Kotani, K. Honke, A. Enomoto, M. Takahashi, K. Furukawa, and K. Furukawa, “ASC amino acid transporter 2, defined by enzyme‐mediated activation of radical sources, enhances malignancy of GD2‐positive small‐cell lung cancer”, Cancer Sci.., 2018, 109, (1), 141.11. N. Hashimoto, K. Hamamura, N. Kotani, K. Furukawa, K. Kaneko, K. Honke, and K. Furukawa, “Proteomic analysis of ganglioside‐associated membrane molecules: Substantial basis for molecular clustering”, Proteomics., 2012, 12, (21), 3154.12. N. Kotani, Y. Ida, T. Nakano, I. Sato, R. Kuwahara, A. Yamaguchi, M. Tomita, K. Honke, and T. Murakoshi, “Tumor-dependent secretion of close homolog of L1 results in elevation of its circulating level in mouse model for human lung tumor”, Biochem. Biophys. Res. Commun.., 2018, 501, (4), 982.13. R. Yamashita, N. Kotani, Y. Ishiura, S. Higashiyama, and K. Honke, “Spatiotemporally-regulated interaction between β1 integrin and ErbB4 that is involved in fibronectin-dependent cell migration”, J. Biol. Chem.., 2011, 149, (3), 347.14. T. Noro, E. Oishi, T. Kaneshige, K. Yaguchi, K. Amimoto, and M. Shimizu, “Identification and characterization of haemagglutinin epitopes of Avibacterium paragallinarum serovar C”, Vet. Microbiol.., 2008, 131, (3-4), 406.

Sandwich ELISA

Fig. 2 Sandwich ELISA of human TNF-α detection

Plate: 2 μg/ml anti-human TNF-aantibody (rabbit, polyclonal)-coated high binding platerecombinant human TNF-a: 0-1000 pg/ml PBSTPeroxidase-conjugated anti-human TNF-aantibody: Prepared by Peroxidase Labeling Kit-SH.1μg/mlPBST+blocking reagentSubstrate: TMB peroxidase substrate

References1. K. Inoue, A. Sugiyama, P. C. Reid, Y, Ito, K. Miyauchi, S. Mukai, M. Sagara, K. Miyamoto, H. Satoh, I. Kohno, T. Kurata, H. Ota, A. Mantovani, T. Hamakubo, H. Daida and T. Kodama, Establishment of a High Sensitivity Plasma Assay for Human Pentraxin3 as a Marker for Unstable Angina Pectoris, Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 2007, 27, 161

Can I use this kit for F(ab”)2?

Yes, please follow the labeling protocol for IgG. The recovery of the conjugate should be over 80%.

Can I use this kit for other proteins or peptides?

Yes, if the molecular weight of the reduced form is greater than 50,000 or less than 5,000, and it has a reactive SH group, or a disulfide group that can be reduced without losing activity. If the molecular weight is greater than 50,000, follow the labeling protocol for IgG, and use 0.5-1 nmol of sample protein for LK09-10. If the molecular weight is less than 5,000, follow the labeling protocol for small molecules. If the molecular weight is between 5,000 and 50,000, contact our customer service at info@dojindo.com or 1-877-987-2667 for more information.

Can I use this kit to label oligopeptides or oligonucleotides?

Yes, if the molecular weights of the oligonucleotide or the oligopeptide are less than 5,000 and they have at least one SH group. Follow the labeling protocol for small molecule.

What is the minimum amount of IgG that can be labeled with LK09-10?

The minimum amount is 50 μg. There is no significant difference in sensitivity and background between 50 μg and 200 μg of IgG. However, even 10 μg IgG can be labeled using 1/5 volume of SH-reactive peroxidase solution at Step 8.

How many peroxidase molecules per reduced IgG are introduced?

The average number of peroxidase molecule per reduced IgG is 1 to 2.

Do I have to use a Filtration tube prior to labeling the protein?

If the protein solution does not contain small molecules with reactive SH groups and the concentration of the protein is 10 mg per ml, or about 70 μM, there is no need to use the Filtration tube. Just mix the sample solution with Solution B and add the mixture to a vial of the SH-reactive peroxidase.

Do I have to use Storage buffer included with the kit?

No, you don’t have to use Storage buffer from the kit. You can choose any kind of buffer appropriate for your experiment. However, the Storage buffer helps to increase the stability of the peroxidase conjugate.

My sample contains small insoluble material. What should I do?

Spin the sample and use the supernatant for labeling.

Does unconjugated SH reactive peroxidase still have a reactive maleimide after the labeling reaction to IgG?

No. Nearly 100% of SH reactive peroxidase is used for the IgG labeling or the small molecule labeling.

Does Storage buffer contain animal products or polymers?

No, Storage buffer does not contain any animal products, polymers, or heavy metal ions.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

WST检测机制

 

ß-半乳糖苷酶检测试剂

细胞增殖/细胞毒性转染细胞染色细胞内荧光探针细菌染色微生物活力测定干细胞分化SPiDER-ßGal线粒体检测细胞代谢

应用 产品展示
细胞生长检测，药物筛选，比色/荧光检测 细胞计数试剂盒-8
细胞计数试剂盒8 + 96孔有机硅定向剂
细胞计数试剂盒-F
细胞毒性LDH检测试剂盒
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MTT
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Dojindo,细胞计数试剂盒 8 和细胞毒性 LDH 检测试剂盒-WST/LDH/CLS01

DescriptionReferencesManual

细胞增殖或细胞毒性的多通道评估很重要。 这对于仔细检查它们以及详细的细胞增殖或细胞毒性作用至关重要。 用WST-8法和Brdu法评价细胞增殖情况； 在本报告中，通过 LDH 测定、WST-8 测定和台盼蓝排除检查了细胞的细胞毒性。 查看更多使用 LDH 测定、WST-8 测定和原代培养肝细胞中 ATP 含量的测量值，Fujimoto 等人。 据报道，SOD2 敲除小鼠可用作肝损伤或线粒体毒性的动物模型。

Kits for Life Science Research

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

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Dojindo,胺反应性PES/10/A543

DescriptionReferencesS.D.S

Product Description

胺反应性 PES 是一种新型的氨基反应性电子介体。 该介体可以通过共价键与葡萄糖脱氢酶等酶连接，有望应用于下一代生物传感器。

新一代电子介体通过用胺反应性PES修饰酶，与酶表面结合的介体能够将电子从还原的辅因子转移到电极。 该传感系统可用于减少电极的介体泄漏和替代昂贵的金属络合物。

Modification of enzymes using Amine-reactive PES is patent pending.

Electrochemical Measurement of Glucose

The concentration of glucose was measured by modifying enzyme using arPES and this sensing system has the potential to develop continuous monitoring for various target molecules such as glucose.

The Sensing System is Applicable to the Following Enzymes– FAD-dependent glucose dehydrogenase (FAD-GDH)– L-Lactate oxidase (Lox)– Fructosyl amino acid oxidase (FAOx)– Cholesterol oxidase (ChOx)– Pyranose oxidase (PyOx)

Procedure for PES-modification

Easy procedure: Just mix enzyme and amine-reactive PES

M. Hatada, N. Loew, Y. Takahashi, J. Okuda-Shimazaki, W. Tsugawa, A. Mulchandani, K. Sode. ” Development of a glucose sensor employing quick and easy modification method with mediator for altering electron acceptor preference.” Bioelectrochemistry, 2018, 121, 185.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

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Dojindo,硫生物-HSip-1/1/SB21

Product Description:硫化氢 (H2S) 作为一种生理活性物质在血管舒张、细胞保护和调节胰岛素分泌方面具有重要作用，这一点已被公认。 H2S 被认为是一种气态分子，例如一氧化氮和一氧化碳。 然而，在生理条件下，约 80% 的总硫化物以硫化氢阴离子 (HS-) 的形式存在，因为 pKa 约为 7。此外，HS- 容易转化为各种生化分子，如过硫化物和多硫化物，与巯基反应 活体中的部分。 -SulfoBiotics- HSip-1 是一种新型荧光探针，可选择性检测 H2S，与 H2S 反应时会发出强烈的绿色荧光。 SulfoBiotics-HSip-1 DA 具有细胞膜渗透性，可对细胞内 H2S 进行荧光成像。

Fig. 2 Excitation and emission spectra of HSip-1 reacted with H2S(Em: 491nm/Ex: 516nm)

1. K. Sasakura, K. Hanaoka, N. Shibuya, Y. Mikami, Y. Kimura, T. Komatsu, T. Ueno, T. Terai, H. Kimura, and T. Nagano, “Development of a Highly Selective Fluorescence Probe for Hydrogen Sulfide”, J. Am. Chem. Soc., 2011, 133, 18003.

Quantification of Hydrogen Sulfide in HeLa cells:1. Preparation of Standard CurveTo quantitate the amount of hydrogen sulfide in a sample, A standard curve was derived from the serial dilutions of hydrogen sulfide donor, Sodium Sulfide.1) 用 PBS 稀释 HSip-1 储备溶液 (10 mmol/l) 以制备 200 μmol/l HSip-1 工作溶液。2) 将硫化钠 (-SulfoBiotics- Sodium Sulfide (Na2S), 7.8 mg) 溶解在 1 ml通过氮气鼓泡制备的脱氧 H2O（100 mmol/l Na2S 溶液）。3) 将 Na2S 溶液（100 mmol/l，20 μl）加入 980 μl 脱氧 H2O 中，制备 2 mmol/l Na2S 溶液.4) 将 Na2S 溶液 (2 mmol/l,100 μl) 添加到 900 μl 脱氧 H2O 中，制成 200 μmol/l Na2S 溶液。5) 用脱氧 H2O 稀释 Na2S 溶液 (200 μmol/l)通过连续稀释（200、100、50、25、12.5、6.3、3.2、0 μmol/l）制备各种浓度的 Na2S 溶液。6）将 HSip-1 工作溶液（200 μmol/l，350 μl）加入到300 μl Na2S 溶液并使用涡旋混合器混合。7) 将溶液在室温下孵育 30 分钟，然后将 200 μl 溶液转移到每个孔（96 孔板）中。8) 测量荧光强度在 516 nm (λex=49 1 nm）与酶标仪。

Fig. Fluorescence intensity changes at 516 nm with various concentrations of hydrogen sulfide.

2. Experimental Example with HeLa Cells1) Inoculate HeLa cells in 96-well microplate and incubate the cells in a CO2 incubator overnight.2) Wash the cells with PBS buffer and remove the supernatant.3) Add Lysis buffer * 100 μl to a well and pipet it to lyse cells.4) Add HSip-1 working solution 100 μl to a well and incubate the cells at room temperature for 30 minutes.5) Measure the fluorescence intensity on a plate reader.( Ex: 491 nm, Em: 516 nm)* Lysis buffer: 6 mol/l Urea, 2% SDS, 150 mmol/l Tris-HCl (pH7.4)The hydrogen sulfide concentration was 3 to 9 μmol/l in HeLa cells. The concentration was obtained from the standard curve, according to the fluorescence intensity of the sample.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

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Dojindo,5-羧基-1-戊硫醇/100/C387

 Product Description
羧基烷硫醇用于修饰金表面以在其上引入羧基。羧基通常转化为活化的 N-羟基琥珀酰亚胺酯，它与生物材料的胺基反应。 Dojindo 新开发的 15-Carboxy-1-pentadecanethiol 具有 15 个碳链，是市场上羧基烷硫醇中最长的烷硫醇。包括 Carboxy-EG6-十一烷硫醇在内的五种不同的羧基烷硫醇可用于金表面改性。 Malone 和其他人使用 15-Carboxy-1-pentadecanethiol 制造了一种高度灵敏的 SPR 传感器。 Glenn 和他的同事使用羧基烷硫醇和聚-L-赖氨酸来制造固定的细胞色素 b5 多层电极。 Mizutani 和其他人以类似的方式制造了固定化葡萄糖氧化酶多层电极。两组都报告了从生物材料到金表面的电子转移。这些类型的多层膜电极非常适用于扩散电子转移的研究。 Frisbie 和其他人开发了一种新方法，化学力显微镜，用于获得图案样品表面的粘合剂相互作用和摩擦图像。他们使用原子力显微镜 (AFM) 来测量化学上不同官能团的相互作用和空间映射。 Frisbie 和其他人在 AFM 悬臂尖端的金表面上形成了羧基烷硫醇单分子层。他们使用原子力显微镜测量分子修饰的探针尖端和有机单层之间的粘附力和摩擦力，这些有机单层以光刻定义的不同官能团图案终止。

1. J. D. H. Glenn and E. F. Bowden, Diffusionless Electrochemistry of Cytochrome b5 Adsorbed on a Multilayer Film Electrode, Chem. Lett., 1996, 399.2. F. Mizutani, Y. Sato, S. Yabuki and Y. Hirata, Enzyme Ultra-thin Layer Electrode Prepared by the Co-adsorption of Poly-L-lysine and Glucose Oxidase onto a Mercaptopropionic Acid-Modified Gold Surface, Chem. Lett., 1996, 251.3. C. D. Frisbie, F. Rozsnyai, A. Noy, M. S. Wrighton and C. M. Lieber, Functional Group Imaging by Chemical Force Microscopy, Science, 1994, 265, 2071.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

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Dojindo,WST-4/100/W203

Product Description of WSTs

通过在四唑盐的苯环上引入正电荷或负电荷和羟基来开发水溶性四唑盐 (WST)。正电荷，例如三烷基铵基团，提高了甲臜染料的水溶性。然而，大的阳离子很容易与有机阴离子如羧酸根或磷酸根一起沉淀出来。虽然羟基也提高了四唑盐的水溶性，但相应的甲臜染料的水溶性不足。 Dojindo 的 WST 在苯环上直接或间接添加磺酸基团，以提高水溶性。 Dojindo 还提供了几种新开发的苯偶氮型四唑盐，它们很容易用 NADH 或其他还原剂还原，得到橙色或紫色的甲臜染料。由于苯偶氮基，颜色随重金属离子而变化。由于 Dojindo 的 WST 的水溶性很高（WST-10 除外），因此可以制备 10 mM 至 100 mM 的溶液。

WST-4, 5: M. Ishiyama, et al., Anal.科学，12, 515 (1996)。

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细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

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Dojindo,Maleimido-C3-NTA/10/M035

DescriptionReferencesS.D.S

Product Description

Maleimido-C3-NTA 用于修饰硫醇基团连接的表面。 通过附着在表面上的 NTA 部分，基因表达的蛋白质，在其末端带有六组氨酸延伸，可以通过 Ni (II) 固定（His-Tag 方法）。 使用这种技术，Noji 博士及其同事能够用荧光显微镜直接观察 F1-ATPase 的旋转。

Chemical Structure

1. E. Hochuli, H. Doeli and A. Schacher, New Metal Chelate Adsorbent Selective for Proteins and Peptides Containing Neighbouring Histidine Residues, J. Chromatogr., 1987, 411, 177.2. E. Hochuli, Large-Scale Chromatography of Recombinant Proteins, J. Chromatogr., 1988, 444, 293.3. Y. C. Sasaki, Y. Suzuki and T. Ishibashi, Fluorescent X-ray Interference from a Protein Monolayer, Science, 1994, 263, 62.4. G. B. Sigal, C. Bamdad, A. Barberis, J. Strominger and G. M. Whitesides, A Self-Assembled Monolayer for The Binding and Study of Histidine-Tagged Proteins by Surface Plasmon Resonance, Anal. Chem., 1996, 68, 490.5. E. L. Schmid, T. A. Keller, Z. Dienes and H. Vogel, Reversible Oriented Surface Immobilization of Functional Proteins on Oxide Surface, Anal. Chem., 1997, 69, 1979.

Dojindo细胞分析

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Dojindo,硫生物-GY4137/10/SB06

Product Description

GYY4137是一种来源于劳森试剂的合成硫化氢供体。 它是水溶性的，通过在水溶液中水解非常缓慢地释放 H2S。 GYY4137 在几份报告中显示出独特的细胞作用，例如抗高血压、抗动脉粥样硬化和抗肿瘤活性。

 

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

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Dojindo,NOC 5/50/N380,NOC 是稳定的 NO-胺复合物

DescriptionApplicationReferencesQ & AS.D.S
Product Description of NOC CompoundsNOC 是稳定的 NO-胺复合物，可在生理条件下自发释放 NO，无需辅因子。 NO 释放速率取决于 NOC 的化学结构。与其他经典的 NO 供体（如硝酸甘油和 nitropurusside）相比，NOCs 自发生成 NO 的机制非常简单，并且副产物不会干扰细胞活动。一个 NOC 分子释放两个 NO 分子（如反应方案所示）；第二个NO分子的释放速度很慢。 NOC 可用于以受控速率将受控数量的纯 NO 添加到实验系统中，且副作用最小。通过改变 NOC 试剂的浓度和选择，可以轻松控制释放的 NO 量。 Dojindo 提供具有不同半衰期的四种不同的 NOC（NOC 5、7、12 和 18）。在碱性溶液（如 NaOH 水溶液）中制备的 NOC 储备溶液相对稳定。然而，NOC 原液应在一天内使用，因为它每天降解约 5%，即使在 -20ºC 下也是如此。在将储备溶液添加到样品溶液后立即开始释放 NO。

一氧化氮释放1。使用 0.1 M NaOH 制备 10 mM NOC 库存溶液。由于NOC原液不稳定，所以放在冰浴上一天用完。 2．将适量的 NOC 储备溶液添加到要释放 NO 的样品溶液中。为保持样品溶液的 pH 值，NOC 储备溶液的体积不应超过样品体积的 1/50。样品溶液应具有足够的缓冲作用。加入 NOC 储备溶液后，NO 将立即释放。

Table 1 pH Dependency of NO Release at 37ºC

1. K. Hayashi, et al., Action of Nitric Oxide as a Antioxidant Against Oxidation of Soybean Phosphatidylcholine Liposomal Membrane. FEBS Lett. 1995;370:37-40. (NOC 12)2. S. Shibuta, et al., Intracerebroventricular Administration of a Nitric Oxide-releasing Compound, NOC-18, Produces Thermal Hyperalgesia in Rats. Neurosci Lett. 1995;187:103-106. (NOC 18)3. S. Shibuta, et al., A new nitric oxide donor, NOC-18, exhibits a nociceptive effect in the rat formalin model. J Neurol Sci. 1996;141:1-5. (NOC 18)4. N. Yamanaka, et al., Nitric Oxide Released from Zwitterionic Polyamine/NO Adducts Inhibits Cu2+-induced Low Density Lipoprotein Oxidation. FEBS Lett. 1996;398:53-56. (NOC 5, NOC 7)5. D. Berendji, et al., Nitric Oxide Mediates Intracytoplasmic and Intranuclear Zinc Release. FEBS Lett. 1997;405:37-41.6. T. Ohnishi, et al., The Effect of Cu2+ on Rat Pulmonary Arterial Rings. Eur J Pharmacol. 1997;319:49-55. (NOC 7)7. Y. Adachi, et al., Renal Effect of a Nitric Oxide Donor, NOC 7, in Anethetized Rabbits. Eur J Pharmacol. 1997;324:223-226. (NOC 7)8. Y. Minamiyama, et al., Effect of Thiol Status on Nitric Oxide Metabolism in the Circulation. Arch Biochem Biophys. 1997;341:186-192. (NOC 7)
How do I prepare a stock solution?

Prepare 10-50 mM NOC solution with 0.1 M NaOH solution. Then add enough NOC solution to the cell culture to obtain a suitable concentration of NOC in cell culture. If the pH of the culture solution changes, use higher concentration of NOC.

What is the solubility of the NOC compounds?

NOC 5: 40 mg per 100 ml 0.1 M NaOH (2.2 M NOC 5)NOC 7: 70 mg per 100 ml 0.1 M NaOH (4.3 M NOC 7)NOC 12: 27 mg per 100 ml 0.1 M NaOH (1.5 M NOC 12)NOC 18: 20 mg per 100 ml 0.1 M NaOH (1.2 M NOC 18)

Is the stock solution stable?

The stock solution will lose 5% of its NOC activity per day, even when stored at -20oC. Please prepare fresh solution prior to use and keep the solution on an ice bath during the experiment. VI-1. Nitric Oxide Research: NO Donors

How is the half-life of NOC determined?

Prepare 20 mM NOC stock solution with 0.1 M NaOH. Warm PBS at 37ºC. Add 100 ml NOC solution to 1.9 ml PBS. Using a UV spectrophotometer, immediately start measuring its absorbance at the maximum wavelength of the NOC. Continue measuring until no further spectra changes are observed.

Can I use NOC for in vivo experiments?

Yes. Please review the papers by Shibata and colleagues (1995, 1996).

Is the amount of NO released in vitro the same as in vivo?

The amount of NO released in the solution should be the same if the pH and temperature are the same. However, the activity of NO may be different in vivo because of other reactive components such as thiol compounds and heme.

Dojindo细胞分析

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

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Dojindo,脂滴检测试剂盒-Blue/1/LD05,Lipid Droplet Assay Kit

Product Description Lipi 探针是在疏水环境（例如 LD）中发出强荧光的小分子。

脂滴的功能脂滴 (LD) 由中性脂质组成，例如三酰基甘油和胆固醇酯，它们被磷脂单层包围，并且无处不在，不仅在脂肪细胞中 1)。 虽然 LDs 被简单地认为是一种脂质储存单元，但最近的一项研究表明，LDs 在调节脂质代谢、自噬2) 和细胞衰老3) 方面发挥着重要作用。因此，作为阐明其机制的重要工具，LDs 受到了极大的关注 LD的形成、生长、融合和收缩。

1) T. Fujimoto et al., “Lipid droplets: a classic organelle with new outfits.” Histochem Cell Biol., 2008, 130(2), 263.2) R. Singh et al., “Autophagy regulates lipid metabolism.” Nature, 2009, 458(7242), 1131.3) M. Yokoyama et al., “Inhibition of endothelial p53 improves metabolic abnormalities related to dietary obesity.” Cell Reports, 2014, 7(5), 1691.

Only by the addition of a reagent, the imaging of lipid droplets (LDs) or the quantitative variation of LDs in live and fixed cells becomes quantifiable.

Lipid Droplet Assay Kit considerably shortens the entire process and can be used for live cells.The fluorescent dye provided in the Lipid Droplet Assay Kit can be used for live and fixed cells. Compared to a method of using a colorimetric reagent, the method of using the Lipid Droplet Assay Kit can shorten measuring time. Furthermore, the repeatability of experiment can be increased by using the Lipid Droplet Assay Kit because the dye is not deposited in a plate.

Experimental example of plate assayChanges in lipid droplets were examined after the addition of oleic acid or Triacsin C (acyl-CoA synthetase inhibitor) to the A549 cell culture medium.

As a result, we confirmed that the oleic acid-treated cells show an increase in the number of LDs, compared to control and Triacsin C-treated cells.

Blue　　 ：Ex. 376 – 386 nm / Em 435 – 455 nmDeep Red ：Ex. 623 – 633 nm / Em 649 – 669 nm

Reagent ComparisonChanges in lipid droplets were examined after the addition of oleic acid or Triacsin C (acyl-CoA synthetase inhibitor) to the HeLa cell culture medium.As a result, we confirmed that the oleic acid-treated cells show an increase in the number of LDs, compared to control and Triacsin C-treated cells.

<Detection Condition>Blue　　 ：Ex. 405 nm/ Em 425 – 475 nmDeep Red ：Ex. 640 nm/ Em 650 – 670 nm

Related Product Information

Function Product Code Product Size
Imaging LD01 Lipi-Blue 10 nmol
LD02 Lipi-Green 10 nmol
LD03 Lipi-Red 100 nmol
LD04 Lipi-Deep Red 10 nmol
Quantification (Plate Reader, FCM) LD05 Lipi Droplet Assay Kit-Blue 1 set
LD06 Lipi Droplet Assay Kit-Deep Red 1 set

Preparing a stock solution of oleic acidRequired Reagents:・BSA (bovine serum albumin)・Oleic acid・0.1 mol/L Tris-HCl (pH 8.0)Procedure:(1) Dissolve 0.14 g/mL BSA in 0.1 mol/L Tris-HCl (pH 8.0).(2) Add 4 mmol/L oleic acid to a disposable centrifuge tube.(3) Add BSA solution (prepared in step 1).(4) Cap the tube and mix on a rotary shaker (Be sure the solution is transparent, indicating that oleic acid has been conjugated to BSA).(4) Filter the solution prepared above (step 4) using 0.22μm filter membranes.(5) Store oleic acid stock solution at 4˚C.*Use the appropriate amount of oleic acid stock solution for culture medium to prepare working solution.*Oleic acid working solution cannot be stored. Please prepare the working solution immediately before usage.

Inducing lipid droplets(1) Incubate cells for 24 hours at 37˚C in a 5% CO2 atmosphere.(2) Add 200 µmol/L working solution (prepared from oleic acid stock solution) to culture medium and incubate for further 24 hours.

Dojindo,抗硝基鸟苷单克隆抗体克隆,NO2G52/50/AB02,8-Nitroguanosine 是 DNA 和 RNA 的硝化碱基

Product Description
8-Nitroguanosine 是 DNA 和 RNA 的硝化碱基。它是由一氧化氮和超氧阴离子自由基生成的过氧亚硝酸盐形成的。已知炎症产生的大量一氧化氮分子和超氧阴离子会引起鸟苷的硝化。由于化学修饰的核苷酸会在 DNA 复制过程中引起突变，因此 8-硝基鸟苷被认为是与突变和癌症相关的 DNA 损伤的标志之一。由于其非常高的特异性，单克隆抗体 NO2G52 可识别 8-硝基鸟嘌呤和 8-硝基鸟苷，但不与正常核苷酸碱基、8-羟基鸟嘌呤、8-羟基脱氧鸟苷、3-硝基酪氨酸、黄嘌呤或 2-硝基咪唑发生交叉反应。图。1）。 NO2G52 的特异性通过使用 8-硝基鸟苷-BSA 包被板的竞争性 ELISA 确定。如下图所示，NO2G52对8-硝基鸟嘌呤和8-硝基鸟苷具有非常高的亲和力，与8-溴鸟苷、8-溴鸟嘌呤和8-氯鸟嘌呤有轻微的交叉反应。抗硝基鸟苷多克隆抗体也可识别 8-硝基鸟苷和 8-硝基鸟苷，但它不与正常的鸟苷、鸟嘌呤、8-羟基鸟嘌呤或 3-硝基酪氨酸发生交叉反应。由于该抗体是使用兔制备的，因此可用于小鼠或大鼠等啮齿动物组织的免疫组织染色。

Fig 1. Specificity of Anti 8-Nitroguanosine monoclonal antibody

1. T. Akaike, et al., 8-nitroguanosine formation in viral pneumonia and its implication for pathogenesis, PNAS. 2003;100:685-690.2. J. Yoshitake, et al., Nitric oxide as an endogenous mutagen for Sendai virus without antiviral activity. J Virol. 2004;78:8709-8719.3. T. Sawa, et al., Protein S-guanylation by the biological signal 8-nitroguanosine 3 E5 Ecyclic monophosphate. Nat Chem Biol. 2007;3:727-735.4. M. H. Zaki, et al., Cytoprotective function of heme oxygenase 1 induced by a nitrated cyclic nucleotide formed during murine salmonellosis. J Immunol. 2009;182:3746-3756.5. Y. Terasaki, et al., Guanine nitration in idiopathic pulmonary fibrosis and its implication for carcinogenesis. Am J Respir Crit Care Med. 2006;174:665-673.6. T. Sawa, et al., Analysis of urinary 8-nitroguanine, a marker of nitrative nucleic acid damage, by high-performance liquid chromatography-electrochemical detection coupled with immunoaffinity purification: association with cigarette smoking. Free Radic Biol Med. 2006;40:711-720.

Dojindo,6-Ferrocenyl-1-hexanethiol/100/F269,氨基烷硫醇和二茂铁烷硫醇的混合 SAM

Product Description of Ferrocenyl Alkanethiols

二茂铁烷基硫醇用于修饰金表面以引入电化学活性分子。修饰的金表面可用于开发灵敏的电化学分析。 Rubin 和其他人在金电极表面制造了具有不同链长的氨基烷硫醇和二茂铁烷硫醇的混合 SAM。他们将葡萄糖氧化酶固定在氨基烷硫醇位点上，并使用二茂铁基-烷硫醇位点作为电子介质。他们报告了混合 SAM 的电响应和链长之间的关系。 Uosaki 及其同事使用傅里叶变换红外反射吸附光谱 (FT-IRRAS) 和电化学石英晶体报告了 11-二茂铁基-1-十一烷硫醇 SAM 在金电极上的氧化还原反应过程中结构变化和吸收的二茂铁烷硫醇数量的结果微量天平（EQCM）方法。他们提出了在二茂铁部分的氧化还原反应期间单层的取向变化的可能性。他们还使用伏安图和椭偏仪估计了这种变化。

1. M. D. Porter, T. B. Bright, D. L. Allara and C. E. D. Chidsey, Spontaneously Organized Molecular Assemblies.4.Structural Characterization of n-Alkyl Thiol Monolayers on Gold by Optical Ellipsometry, Infrared Spectroscopy, and Electrochemistry, J. Am. Chem. Soc., 1987, 109, 3559.2. C. E. D. Chidsey, C. R. Bertozzi, T. M. Putvinski and A. M. Mujsce, Coadsorption of Ferrocene-Terminated and Unsubstituted Alkanethiols on Gold: Electroactive Self-Assembled Monolayers, J. Am. Chem. Soc., 1990, 112, 4301.3. J. J. Hickman, D. Ofer, P. E. Laibinis, G. M. Whitesides and M. S. Wrighton, Molecular Self-Assembly of Two-Terminal, Voltammetric Microsensors with Internal references, Science, 1991, 252, 688.4. C. E. D. Chidsey, C. R. Bertozzi, T. M. Putvinski and A. M. Mujsce, Coadsorption of Ferrocene-Terminated and Unsubstituted Alkanethiols on Gold:Electroactive Self-Assembled Monolayers, Chemtracts, 1991, 3, 27.5. K. Uosaki, Y. Sato and H. Kita, Electrochemical Characteristics of a Gold Electrode Modified with a Self-Assembled Monolayer of Ferrocenylalkanethiols, Langmuir, 1991, 7, 1510.6. Y. Kajiya, T. Okamoto and H. Yoneyama, Glucose Sensitivity of Thiol-modified Gold Electrodes Having Immobilized Glucose Oxidase and 2-Aminoethylferrocene, Chem. Lett., 1993, 2107.7. T. Ohtsuka, Y. Sato and K. Uosaki, Dynamic Ellipsometry of a Self-Assembled Monolayer of a Ferrocenylalkanethiol during Oxidation-Reduction Cycles, Langmuir, 1994, 10, 3658.8. K. Shimazu, I. Yagi, Y. Sato and K. Uosaki, Electrochemical Quartz Crystal Microbalance Studies of Self-Assembled Monolayers of 11-ferrocenyl-1-undecanethiol: Structure-dependent Ion-pairing and Solvent Uptake, J. Electroanal. Chem., 1994, 372, 117.9. T. Kondo, M. Takechi, Y. Sato and K. Uosaki, Absorption Behavior of Functionalized Ferrocenylalkane Thiol and Disulfide onto Au and ITO and Electrochemical Properties of Modified Electrodes: Effects of Acyl and Alkyl Groups Attached to the Ferrocene Ring, J. Electroanal. Chem., 1995, 381, 203.10. J. l. Anderson, E. F. Bowden and P. G. Pickup, Dynamic Electrochemistry : Methodology and Application E Anal. Chem., 1996, 68, 379R.11. K. Chen, F. Xu and C. A. Mirkin, Do Alkanethiols Adsorb onto the Surfaces of Tl-Ba-Ca-Cu-O-Based High-Temperature Superconductors? The Critical Role of H2O Contact on the Adsorption Process, Langmuir, 1996, 12, 2622.12. S. Rubin, G. Bar, R. W. Cutts, J. T. Chow, J. P. Ferraris and T. A. Zawodzinski Jr., Electrical Communication Between Glucose Oxidase and Different Ferrocenylalkanethiol Chain Lengths, Mat. Res. Soc. Symp. Proc., 1996, 413, 377.13. R. C. Sabapathy, S. Bhattacharyya, W. E. Cleland Jr. and C. L. Hussey, Host-Guest Complexation in Self-Assembled Monolayers: Inclusion of a Monolayer-Anchored Cationic Ferrocene-Based Guest by Cyclodextrin Hosts, Langmuir, 1998, 14, 3797.

Dojindo,荧光素标记试剂盒-NH2/3/LK01,Fluorescein Labeling Kit-NH2

Product Description
Fluorescein Labeling Kit-NH2 主要用于制备荧光素标记的蛋白质，例如用于免疫染色的 IgG 和用于示踪的细胞蛋白质。胺反应性荧光素是该试剂盒的一个成分，具有与蛋白质或其他分子上的氨基反应的琥珀酰亚胺基 (NHS)（图 1）。该试剂盒包含标记所需的所有试剂，包括储存缓冲液。每小瓶荧光素可标记多达 200 μg 的 IgG，每个 IgG 分子结合约 4 至 6 个荧光素分子。由于该试剂盒还包括缓冲液交换系统，因此可以标记含有胺碱缓冲液的样品。尽管膜过滤有时会导致 IgG 聚集，但该试剂盒中的缓冲系统可防止在 IgG 或荧光素标记的 IgG 溶液浓缩期间发生聚集。使用该试剂盒制备的荧光素标记的 IgG 溶液在 4ºC 下可稳定保存 2 个月以上。荧光素标记的 IgG 的激发和发射波长分别为 495 nm 和 520 nm

 

Precaution♦ 使用本试剂盒标记的蛋白质的分子量应大于 50,000。♦ 标记过程中，IgG 或荧光素结合的 IgG 始终在过滤管的膜上。♦ 如果 IgG 溶液中含有其他具有分子量的蛋白质 大于 10,000，例如 BSA 或明胶，在使用该试剂盒标记荧光素之前纯化 IgG 溶液。 IgG 溶液可通过 IgG 纯化试剂盒（本试剂盒未包含）进行纯化。♦ 如果 IgG 溶液含有少量不溶性物质，则将溶液离心并使用上清液进行标记。

1. M. Hiyoshi, S. Suzu, Y. Yoshidomi, R. Hassan, H. Harada, N. Sakashita, H. Akari, K. Motoyoshi and S. Okada, “Interaction between Hck and HIV-1 Nef Negatively Regulates Cell Surface Expression of M-CSF Receptor”, Blood, 2008, 111(1), 243.2. W. Aung, A. Tsuji, H. Sudo, A. Sugyo, T. Furukawa, Y. Ukai, Y. Kurosawa and T. Saga, “Immunotargeting of Integrin α6β4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model”, Molecular Imaging, 2016, 15, 1.3. S. Abe, K. Yamamoto, M. Kurata, S. Abe-Suzuki, R. Horii, F. Akiyama and M. Kitagawa, “Targeting MCM2 function as a novel strategy for the treatment of highly malignant breast tumors”, Oncotarget., 2015, 6, (33), 34892.4. K.M. Nishida, T.N. Okada, T. Kawamura, T. Mituyama, Y. Kawamura, S. Inagaki, H. Huang, D. Chen, T. Kodama, H. Siomi and M.C. Siomi, “Functional involvement of Tudor and dPRMT5 in the piRNA processing pathway in Drosophila germlines”, EMBO J.., 2009, 28, (24), 3820.5. P.G. Sreekumar, R. Kannan, M. Kitamura, C. Spee, E. Barron, S.J. Ryan and D.R. Hinton, “αB crystallin is apically secreted within exosomes by polarized human retinal pigment epithelium and provides neuroprotection to adjacent cells”, PLoS ONE., 2010, 5, (10), e12578.6. R. Asano, T. Kumagai, K. Nagai, S. Taki, I. Shimomura, K. Arai, H. Ogata, M. Okada, F. Hayasaka, H. Sanada, T. Nakanishi, T. Karvonen, H. Hayashi, Y. Katayose, M. Unno, T. Kudo, M. Umetsu and I. Kumagai, “Domain order of a bispecific diabody dramatically enhances its antitumor activity beyond structural format conversion: the case of the hEx3 diabody”, Protein Eng. Des. Sel.., 2013, 26, (5), 359.7. R. Asano, I. Shimomura, S. Konno, A. Ito, Y. Masakari, R. Orimo, S. Taki, K. Arai, H. Ogata, M. Okada, S. Furumoto, M. Onitsuka, T. Omasa, H. Hayashi, Y. Katayose, M. Unno, T. Kudo, M. Umetsu and I. Kumagai, “Rearranging the domain order of a diabody-based IgG-like bispecific antibody enhances its antitumor activity and improves its degradation resistance and pharmacokinetics”, MAbs., 2014, 6, (5), 1243.8. R. Asano, K. Ikoma, I. Shimomura, S. Taki, T. Nakanishi, M. Umetsu and I. Kumagai, “Cytotoxic enhancement of a bispecific diabody by format conversion to tandem single-chain variable fragment (taFv): the case of the hEx3 diabody”, J. Biol. Chem.., 2011, 286, (3), 1812.9. T. Toyotome, M. Yamaguchi, A. Iwasaki, A. Watanabe, H. Taguchi, L. Qin, H. Watanabe and K. Kamei, “Fetuin A, a serum component, promotes growth and biofilm formation by Aspergillus fumigatus”, Int. J. Med. Microbiol.., 2012, 302, (2), 108.10. W. Ma, V. Schubert, M. M. Martis, G. Hause, Z. Liu, Y. Shen, U. Conrad, W. Shi, U. Scholz, S. Taudien, Z. Cheng and A. Houben, “The distribution of α-kleisin during meiosis in the holocentromeric plant Luzula elegans”, Chromosome Res.., 2016, 24, (3), 393.11. Y. Yokoi, K. Nakamura, T. Yoneda, M. Kikuchi, R. Sugimoto, Y. Shimizu and T. Ayabe, “Paneth cell granule dynamics on secretory responses to bacterial stimuli in enteroids”, Sci. Rep.., 2019, 9, 2710.12. Y.J. Lee, S.R. Han, N.Y. Kim, S.H. Lee, J.S. Jeong and S.W. Lee, “An RNA aptamer that binds carcinoembryonic antigen inhibits hepatic metastasis of colon cancer cells in mice”, Gastroenterology., 2012, 143, (1), 155.

Can I use this kit for other proteins?

Yes, if the molecular weight is greater than 50,000.

Do I have to use a Filtration tube prior to labeling the protein?

If the protein solution does not contain small molecules with an amino group and the concentration of the protein is 10 mg per ml, or about 70 μM, there is no need to use the Filtration tube. Just mix 10 μl of the sample solution with 90 μl of Reaction buffer and add 8 μl NH2-reactive fluorescein (prepared at step 3) to the mixture, and follow the protocol starting at step 4.

How long is the fluorescein-labeled protein stable?

If you store at 4ºC, it is stable for over 2 months. For longer storage, add 100% volume of glycerol, aliquot, and store at -20ºC. However, please note that stability depends on the protein itself.

What is the minimum amount of IgG that can be labeled by this kit?

The minumum amount of IgG is 10 μg; simply follow the protocol. The labeling ratio remains the same for 10 μg to 100 μg of IgG.

Can I use this kit to label oligonucleotides or peptides?

No. Oligonucleotides and peptides may be too small to retain on the membrane filter of the Filtration tube.

Dojindo,IC5-OSu special packaging/20/I272

Product Description
IC3 和 IC5 是吲哚菁染料，可与蛋白质、肽和胺修饰寡核苷酸上的胺基反应。 由于IC3和IC5在结构中都没有磺酸基，分子的水溶性非常低。 溶解该化合物需要有机溶剂。 由于水溶性差，用这些化合物过度标记蛋白质可能会使标记的蛋白质从水溶液中沉淀出来。 然而，由于没有向蛋白质添加负电荷，因此修饰蛋白质的总电荷数在用这些化合物标记之前和之后是相同的。 IC 染料包装包含 100 ug 染料。 根据下游实验的目的，这个量足以修饰 1-2 mg 或更多的蛋白质。

Dojindo,氨基-EG6-十一烷硫醇-盐酸盐/10/A483

Product Description

聚乙二醇 (PEG) 广泛用于材料改性以提高表面的亲水性。 PEG 涂层材料通常在生理条件下更稳定。 由于氨基-EG6-十一硫醇具有6个乙二醇单元，11个碳原子，末端有一个SH基团，可用于在金表面制备高度取向和亲水的SAM。 由于提高了亲水性，这适用于表面上的生物材料标记。 亲水表面可以防止蛋白质或其他生物材料发生非特异性结合。 因此，该试剂制备的SAM将为开发生物材料传感器或DNA/蛋白质微阵列提供更好的表面。 为了在金表面上制备氨基-EG6-SAM，羟基-EGn-十一硫醇（n = 3, 6）用于根据引入到表面上的分子的密度来稀释氨基的数量。

How to Prepare SAM1. Soak a gold-coated glass plate in Piranha solutiona) for 10-15 minutes. Wash the plate with purified water.a)2. Dissolve aminoalkanethiol compound in ethanol to prepare several mM to several ten mM solutions.3. Soak the plate in the aminoalkanethiol solution for a certain time period.b)4. Wash the SAM-coated plate with ethanol and then water.5. Dry the plate under nitrogen atmosphere, if necessary.

a)Piranha solution: sulfuric acid and 30% hydrogen peroxide, 3:1. Piranha solution is a strong oxidizing agent. Extreme care is necessary when using it.Do not apply Piranha solution to resin-coated plates; it may erode the resin.b)To prepare a SAM-coated plate with the best performance, aminoalkanethiol concentration and soaking time should be individually determined.

Application of SAM-Preparation of DNA Array (Fig. 1)1. Use SF10 glass slides (Schott Glass Technologies) coated with 5 nm chromium and 45 nm gold thin film.2. Soak the glass slide in a 1 mM 1-octadecanethiol (ODT)/ethanol solution overnight to prepare ODT SAM-coated slide.3. Draw 500 μm x 500 μm patterns on the ODT SAM-coated slide by UV irradiation with an Hg-Xe arc lamp.a)4. Soak the slide in a 1 mM 11-amino-1-undecanethiol (AUT)/ethanol solution for 2 hours to form AUT SAM on the 500 μm x 500 μm photopatterned area.5. Drop 2 mM SPDP solutionb) onto the slide and leave the slide at room temperature.6. Wash the slide and dry under nitrogen atmosphere.7. Apply 1 mM thiol-DNA solutionc) to each 500 μm x 500 μm pattern and incubate at room temperature overnight.8. Incubate the slide with a sample solution for 10 minutes and wash with phosphate buffer, followed by SPR imaging.

a)Irradiation time: 1-1.5 hoursb)SPDP: N-succinimidyl 3-(2-pyridyldithio)propionate. Dissolve SPDP in DMSO to prepare 50 mM solution. Dilute it 25 times with 100 mM triethanolamine buffer, pH 7.0.c)Dissolve thiol-DNA with 100 mM triethanolamine buffer, pH 8.0.

 

细胞活力和细胞毒性测定用于药物筛选和化学物质的细胞毒性测试。Dojindo开发了高度水溶性的四唑盐，称为WST。WST-8是高度稳定的WST，用于Cell Counting Kit-8（CCK-8）。由于WST-8甲maz是水溶性的，因此不会形成晶体。因此，不需要诸如MTT测定的增溶过程。此外，CCK-8的检测灵敏度高于其他四唑盐，例如MTT，XTT，MTS或WST-1。

 

Dojindo,Bacstain-DAPI溶液/100/BS04

染色程序1。 让 DAPI 溶液 a) 在室温下静置 30 分钟。 溶液应避光。2． 用PBS(-)或生理盐水重悬菌体，调整细胞数至106cells/mL(流式细胞仪)或108-109cells/mL(显微镜)。 3． 将 1 μL 的 DAPI 溶液加入微生物细胞悬浮液中，轻轻涡旋混合。 必要时可推荐甲醛固定法。 4． 将微生物细胞在室温下孵育 5 分钟。 5． 通过流式细胞仪或显微镜分析染色细胞。 染料的最大波长为 360 nm 激发和 460 nm 发射。

a) 由于 DAPI 可能致癌，因此在处理和处置时要小心。

Dojindo,10-CDPA/100/C490

Product Description
膦酸衍生物用于氧化金属的表面改性，如 Al2O31)、TiO22)、ZrO23)、SiO24)、Mica5)、不锈钢(SS316L)6)、镍钛诺7)、羟基磷灰石8)、AgO9)、ZnO10)、ITO11、12 ). 长期以来，有机硅烷一直被用于在金属氧化物上形成自组装单层 (SAM)。然而，由于试剂之间的稳定性和聚合性差，在应用中并不总是适用。另一方面，膦酸衍生物同样在金属氧化物上形成SAM，尽管它们是非常稳定的化合物。此外，据报道，膦酸衍生物使用形成比有机硅烷更稳定和致密的 SAM。克劳克等。人。和 Sekitani 等。人。显示 Al2O3 上的烷基膦酸 SAM 比三氯硅烷衍生物 SAM 作为有机晶体管的导体膜更有用 13)。10-CDPA 是一种含有羧酸末端的烷基膦酸衍生物。张等人。已经在 ZnO 表面上使用 10-CDPA 的 SAM 作为生物传感器。

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