抗Ⅲ型胶原抗体说明书

【中文名称】抗Ⅲ型胶原抗体

【英文名称】Collagen III

产品规格】:0.1ml/0.2ml

【抗体来源】:Rabbit OR Mouse

产品用途】:用于免疫组化实验,WB实验,相应的标记抗体有HRP标记抗体,FITC标记,BIO等。

【货 期】: 现货

【性 状】: Lyophilized or Liquid

【浓 度】: 1mg/1ml

【亚 型】: IgG

储存方式】: 贮存于-20℃.

【相关标记】:HRP Biotin Gold RBITC AP FITC Cy3 Cy5 Cy5.5 Cy7 PE PE-Cy3 PE-CY5 PE-CY5.5 PE-CY7 APC Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 647  

溶解方法:方法1:我们的抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;

方法2:也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。我们的抗体(冻干粉),在常温放置下,至少一个月有效;若在-20℃下保存(推荐),至少三年有效。

抗体修复方式:

方法1:沸水浴修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于沸水浴环境,保持外部沸腾状态15min,自然冷却至室温;

方法2:微波修复,将盛有修复液和玻片的烧杯置于微波炉中,高火5min,停火3min,中火5min,自然冷却至室温。

酶标抗体效价测定程序:各种HRP酶标记成抗体的效价测定程序如下(如:羊抗鼠IgG-HRP的效价测定):

1、抗原包板:15ug/ml 小鼠IgG-pH9.6·CB液 0.1ml/孔;

2、37°C包被60min或4°C过;

3、PBST洗板3次,5min/次;

4、加入倍比稀释的HRP标记抗体 0.1ml/孔;

5、37°C 30min;

6、PBST洗板5min/次×3;

7、底物液0.1ml/孔 37°C 5-10min;

8、终止液:2N H2SO4 0.05ml/孔;

9、450nm 测定OD值;

10、阳性OD值比对照值大3倍,为判断效价稀释度。

抗体,也叫免疫球蛋白 (Ig),是一种能特异性结合抗原的糖蛋白,而抗原是在易感染动物体内引发抗体产生的物质。在体内,抗体是由于外 源性分子的侵袭而产生的。抗体以一个或者多个 Y 字形单体存在,每个 Y 字形单体由 4 条多肽链组成,包含两条相同的重链和两条相同的轻 链。轻链和重链是根据它们的分子量大小来命名的。Y 字形结构的顶端是可变区,为抗原结合部位。
任何一个抗体的轻链都可以分为κ或λ型(基于小分子多肽结构上的差异),每一个抗体的重链则决定了它的类或型。抗体制备是指通向抗体生成的步骤,包括抗原样品的制备以及将其安全注入实验动物或家畜体内,并由此诱发抗原特异性抗体在血清内达到高表达水平,然后可从该动物体内回收抗体。

抗体优点:
①耐热、耐酸、耐碱、抗有机溶剂以及金属离子,稳定性好,室温下可以长期保存;
②制备简单,操作方便,可以进行批量生产;
③不必免疫动物,且可获得免疫动物所不能得到的“抗体”;
④可以反复使用;
⑤价格低廉。因此,设计、合成既具有类似生物抗体的高亲合性和高专一性,又具有耐热、耐酸、耐碱且又可以长期稳定的人工抗体,在部分领域替代生物抗体以进行仿生分子识别,或者完成一些生物抗体所不能完成的工作,具有重要的科学意义,在化学、生命科学和环境科学等方面具有广阔的应用前景。

多抗和单抗特性比较:
(1)均一性。一种单抗中,每个抗体的化学结构和氨基酸顺序都相同,只有一种Ig亚类。多抗是多种种类和亚类Ig的混合物。
(2)稳定性。单抗对PH变化敏感,对热不稳定,提纯过程中易变性,而多抗的稳定性则较好。
(3)特异性。单抗是单一地针对抗原的某一决定簇,所以用它进行血清学反应时,特异性强,敏感性高,一般不发生交叉反应。而多抗能与抗原上的多种抗原决定簇结合,所以特异性较差,较易引起交叉反应。
(4)重复性。单抗的重复性好,而多抗每批都不一样。
(5)沉淀反应。多抗由于与抗原多价结合容易形成网络样沉淀,而单抗只与抗原结合产生二聚体,不能直接形成抗原抗体沉淀物。

原创作者:上海生物科技有限公司

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