IDT埃德特 编辑基因组Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA

产品介绍

CRISPR-Cas9 gRNA

引导 RNA (gRNA) 包含将 Cas9 蛋白引导到某个基因组位置的目标特异性序列。我们提供 3 种 gRNA 格式:crRNA:tracrRNA 双链体、crRNA XT:tracrRNA 双链体以及单链引导 RNA (sgRNA)。

CRISPR-Cas9 crRNA

产品规格
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA,2 nmol
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA,10 nmol
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA,2 nmol,板装
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA,10 nmol,板装
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA,50 nmol
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA,100 nmol

CRISPR-Cas9 crRNA XT

适用于具有挑战性的实验条件(例如,高核酸酶环境或具有 Cas9 mRNA)

产品规格
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA XT,2 nmol
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA XT,10 nmol
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA XT,2 nmol,板装
Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA XT,10 nmol,板装

 

Alt-R CRISPR-Cas9 系统

 

轻松导入核糖核蛋白复合物(crRNA:tracrRNA:Cas9 或 sgRNA:Cas9)。

CRISPR-Cas9 sgRNA

由 crRNA 和 tracrRNA 序列组成的单链 RNA 分子。适用于具有挑战性的实验条件

产品规格
Alt-R™ CRISPR-Cas9 sgRNA, 2 nmol
Alt-R™ CRISPR-Cas9 sgRNA, 10 nmol
Alt-R™ CRISPR-Cas9 sgRNA, 50 nmol
Alt-R™ CRISPR-Cas9 sgRNA, 100 nmol
定制 Alt-R CRISPR sgRNA

 

CRISPR-Cas9 tracrRNA

产品规格 货号
Alt-R® CRISPR-Cas9 tracrRNA, 5 nmol 1072532
 

Alt-R® CRISPR-Cas9 tracrRNA, 20 nmol 1072533
Alt-R® CRISPR-Cas9 tracrRNA, 100 nmol 1072534
Alt-R® CRISPR-Cas9 tracrRNA, ATTO™ 550, 5 nmol 1075927
Alt-R® CRISPR-Cas9 tracrRNA, ATTO™ 550, 20 nmol 1075928
Alt-R™ CRISPR-Cas9 tracrRNA, ATTO™ 488, 20 nmol 10007810
Alt-R™ CRISPR-Cas9 tracrRNA, ATTO™ 647, 20 nmol 10007853

是什么让 Alt-R CRISPR-Cas9 系统如此出色?

  • 化学修饰有助于增加核酸酶抗性和降低先天性免疫应答
  • 特有的支持试剂(电穿孔增强子、经标记的 tracrRNA、对照)助力成功完成编辑

 

 

IDT埃德特 编辑基因组Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA

图 1. Alt-R CRISPR-Cas9 系统实验中,使用 (A) 双链体引导 RNA(crRNA:tracrRNA 双链体)或 (B) sgRNA,通过脂质体转染、电穿孔或显微注射导入核糖核蛋白的过程概览。

CRISPR-Cas9 基因组编辑方法使用 Cas9 核酸内切酶产生 DNA 双链断裂。Cas9 核酸内切酶需要 CRISPR RNA (crRNA) 来指定 DNA 目标序列,crRNA 必须与反式激活 crRNA (tracrRNA) 结合以激活核酸内切酶并产生具有编辑功能的核糖核蛋白复合物(图 1A)。在另一种方法中,crRNA 和 tracrRNA 可以作为单链 RNA 寡核苷酸导入(图 1B)。切割后,通过非同源末端连接 (non-homologous end-joining, NHEJ) 或同源定向重组修复 (homology-directed recombination, HDR) 对 DNA 进行修复,从而得到一个经过修饰的序列。Alt-R CRISPR-Cas9 试剂和试剂盒提供了利用该通路进行基因组编辑研究所需的经过优化的重要工具。

Alt-R CRISPR-Cas9 系统
核糖核蛋白组分

选择 1:Alt-R CRISPR-Cas9 crRNA:tracrRNA

Alt-R CRISPR-Cas9 crRNA

  • 应与 tracrRNA 一起使用
  • 目标特异性 RNA 寡核苷酸,基于您的序列定制合成
  • 含有化学修饰,可防止被细胞核糖核酸酶降解
  • crRNA XT 含有额外的修饰,在具有挑战性的条件下(例如,高核酸酶环境或具有 Cas9 mRNA)使用双链体 gRNA 时,可提高功能稳定性和活性

Alt-R CRISPR-Cas9 tracrRNA

  • 适合与 crRNA 或 crRNA XT 一起使用
  • 通用 RNA 寡核苷酸(未标记或经过荧光标记),与 crRNA 形成 RNA 双链体,随后再与 Cas9 核酸酶复合
  • 含有额外的化学修饰,有助于防止被细胞 RNase 降解
选择 2:Alt-R CRISPR-Cas9 sgRNA
  • crRNA:tracrRNA 的替代选择
  • 一种包含 crRNA 和 tracrRNA 区域的融合单链长 RNA 寡核苷酸
  • 含有额外的化学修饰,在具有挑战性的条件下(例如,高核酸酶环境或具有 Cas9 mRNA)使用 gRNA 时,可提高功能稳定性和活性
Alt-R S.p. Cas9 核酸酶/切口酶
  • 这类蛋白质与 crRNA:tracrRNA 双链体相结合,形成可直接用于实验的活性核糖核蛋白 (RNP) 复合物
  • 提供 Cas9 野生型、HiFi 或切口酶变体(D10A 和 H840A)
  • 包含核定位信号 (nuclear localization signal, NLS),可改善功能
其他试剂和试剂盒
Alt-R CRISPR-Cas9 对照试剂盒
  • Human, or mouse
  • 包含阳性对照 crRNA、阴性对照 crRNA、tracrRNA、用于分析经阳性对照 crRNA 转染的样本的 PCR 引物
Alt-R CRISPR-Cas9 电穿孔增强子 适用于原代和难转染细胞
Alt-R HDR 增强子 V2 用于提高同源定向重组修复率
Alt-R 基因组编辑检测试剂盒 For mutation identification and estimating editing efficiency

核糖核蛋白组分

Alt-R CRISPR-Cas9 系统提供了两种生成合成引导 RNA 的选择。双链体系统将经优化的精短型通用 tracrRNA 寡核苷酸 (67 nt) 与经优化的精短型目标特异性 crRNA 寡核苷酸 (36 nt) 配对,以提升 Cas9 对 dsDNA 目标区域的靶向性(图 2)。单链引导 RNA (sgRNA) 选择将 crRNA 和 tracrRNA 片段融合成一个长链 RNA 分子,减少了组分数量,简化了 CRISPR 工作流程。

IDT埃德特 编辑基因组Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA

虽然作为 RNP 的一部分导入 Cas9 核酸酶是******方法,但 Alt-R CRISPR-Cas9 系统也与所有来源的化脓性链球菌 Cas9 兼容,包括稳定表达化脓性链球菌 Cas9 核酸内切酶的细胞,或当 Cas9 以 DNA 或 mRNA 构建体引入时

Cas9 比较图

IDT埃德特 编辑基因组Alt-R® CRISPR-Cas9 crRNA

 

 

 

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