IDT埃德特 CRISPR 核酸酶

产品介绍

产品特点：

 

 

 

 

  • 核定位信号 (Nuclear localization signal, NLS) 提高了基因组编辑效率
  • 用于构成核糖核蛋白 (ribonucleoprotein, RNP) 复合物
  • 高纯度酶

     

    Cas9核酸酶

    重组化脓性链球菌Cas9核酸酶，从表达核酸酶的大肠杆菌菌株中纯化。

    包含核定位序列 （NLS） 和 C 末端 6-His 标签。

    以 10 μg/μL 的溶液形式提供，100 μg Cas9 核酸酶 = 610 pmol。

    产品 货号
    Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 100 µg 1081058
    Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 500 µg 1081059
    Alt-R™ S.p. Cas9 Nuclease V3, 5 mg 10000735
    Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 100 µg 1081060
    Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 500 µg 1081061
    Alt-R™ S.p. HiFi Cas9 Nuclease V3, 5 mg 10007803

    SpCas9 Nuclease (Glycerol-Free)

    产品 货号
    Alt-R™ S.p. Cas9 V3, glycerol-free, 100µg 10007806
    Alt-R™ S.p. Cas9 V3, glycerol-free, 500µg 10007807
    Alt-R™ S.p. Cas9 V3, glycerol-free, 5mg 10007808

    Cas9-GFP (or RFP) Nuclease

    产品 货号
    Alt-R™ S.p. Cas9-GFP V3, 100 µg 10008100
    Alt-R™ S.p. Cas9-GFP V3, 500 µg 10008161
    Alt-R™ S.p. Cas9-RFP V3, 100 µg 10008162
    Alt-R™ S.p. Cas9-RFP V3, 500 µg 10008163

    Cas9 Nickase

    产品 货号
    Alt-R™ S.p. Cas9 D10A Nickase V3, 100 µg 1081062
    Alt-R™ S.p. Cas9 D10A Nickase V3, 500 µg 1081063
    Alt-R™ S.p. Cas9 H840A Nickase V3, 100 µg 1081064
    Alt-R™ S.p. Cas9 H840A Nickase V3, 500 µg 1081065

    dCas9 Protein

     
     

    Cas12a 核酸酶

    As Cas12a (Cpf1) Nuclease

    产品 货号
    Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 100 µg 10001272
    Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 500 µg 10001273
    Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) Ultra, 5 mg 10007804
    Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) V3, 100 µg 1081068
    Alt-R™ A.s. Cas12a (Cpf1) V3, 500 µg 1081069

    Lb Cas12a (Cpf1) Nuclease

    产品 货号
    Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 100 µg 10007922
    Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 500 µg 10007923
    Alt-R™ L.b. Cas12a (Cpf1) Ultra, 5 mg 10007924

    应使用哪种 Cas9 酶

    IDT埃德特 CRISPR 核酸酶

    Cas12a (Cpf1) 蛋白

    Alt-R A.s. Cas12a (Cpf1) V3 核酸酶

    Alt-R A.s. Cas12a (Cpf1) Nuclease V3 enzyme is a high purity, recombinant Acidaminococcus sp. BV3L6 Cas12a. 当没有 Cas9 特异性 PAM 序列 (NGG) 时，这种酶对于靶向 AT 富集区非常有用。这些酶包括核定位序列 (nuclear localization sequences, NLS) 和 C 末端 6-His 标签。Cas12a 酶必须与 gRNA 结合才能产生一种功能性的目标特异性编辑复合物。为了获得出色的编辑效果，将 Alt-R A.s. Cas12a (Cpf1) 核酸酶 V3 与经优化的 Alt-R CRISPR-Cas12a (Cpf1) crRNA 等摩尔量结合。

    使用 Cas9 或 Cas12a (Cpf1) 进行 CRISPR 基因组编辑的比较

      Cas9 系统 Cas12a 系统
    应用
    • 一般的基因组编辑
    • 用于基因组中富含 AT 的物种
    • 用于设计空间有限、不能使用 CRISPR-Cas9 系统的区域
    核糖核蛋白组分
    • gRNA 选择：
      1. crRNA 和 tracrRNA
      2. sgRNA
    • Cas9 核酸内切酶
    • crRNA
    • Cas12a 核酸内切酶
    变体
    • 野生型
    • HiFi
    • 切口酶（H840A 和 D10A）
    • Cas9-GFP（或 RFP）
    • 野生型
    • Ultra（性能更佳）
    Cas9 crRNA:tracrRNA（选择 1）

    crRNA

    • 天然：42 nt
    • Alt-R：35–36 nt（建议 36 nt）

    tracrRNA

    • 天然：89 nt
    • Alt-R：67 nt
    		 —
    Cas9 sgRNA（选择 2）
    • Alt-R：99–100 nt（建议 100 nt）
    		 —
    Cas12a crRNA —
    • 天然：42–44 nt
    • Alt-R：40–44 nt（建议 41 nt）
    CRISPR 酶
    • Class 2，Cas type II
    • M.W.*：162,200 g/mol
    • 核酸内切酶结构域：RuvC-like 和 HNH
    • Class 2，Cas type V
    • M.W.*：156,400 g/mol
    • 核酸内切酶结构域：仅 RuvC-like
    DNA 切割
    • 野生型和 HiFi：在前间隔序列上游 3 个碱基位置切割，形成平末端
    • D10A 切口酶和配对 gRNA：5′ 黏末端
    • H840A 切口酶和配对 gRNA：3′ 黏末端
    • PAM 位点在基因组编辑过程中经常被破坏
    • 在前间隔序列的 5′ 端切割，形成 5′ 黏末端
    • PAM 位点在基因组编辑后可能会继续存在
    PAM 序列†
    • NGG
    • 对于 Cas12a V3，为 TTTV
    • 对于 Cas12a Ultra，为 TTTN
    当前建议导入 Alt-R RNP 的方法
    • 脂质体转染
    • 电穿孔（建议使用 Alt-R 增强子）
    • 显微注射
    • 电穿孔（建议使用 Alt-R 增强子）
    • 显微注射

    * Alt-R 核酸酶的分子量
    † N = 任意碱基；V = A、C、或 G

     

    产品 货号
    Alt-R™ S.p. dCas9 Protein V3, 100 µg 1081066  
     
    Alt-R™ S.p. dCas9 Protein V3, 500 µg 1081067

     

     

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