DH5α Chemically Competent Cell
大肠杆菌化学感受态细胞
货号 | 产品名称 | 规格 | |
MF2311-2000UL | DH5α Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 20×100μl | |
MF2311-10000UL | DH5α Chemically Competent Cell大肠杆菌化学感受态细胞 | 100×100μl |
产品组分:
组分编号 | 组分名称 | 货号(规格) | |
MF2311-2000UL | MF2311-10000UL | ||
MF2311-A | DH5α Competent Cell | 20×100μl | 100×100μl |
MF2311-B | Control Plasmid puC19, 0.1ng/μl | 10μl | 10μl |
菌株描述
DH5α是实验室常用的一种质粒克隆用菌株,其φ80lacZ△M15基因的产物可与载体编码的 β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。特别适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
DH5α菌株基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA
产品描述
本品是大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺制作所得的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。经pUC19质粒检测转化效率可达108 cfu/μg DNA。且在-80℃能稳定保存几个月转化效率不发生改变。
注意事项
1) 感受态细胞必须用干冰运输。感受态细胞应在-80℃保存,不可反复冻融且放置时间过长,否则会减低感受态细胞的转化效率。
2) 号在冰上融化感受态细胞。
3) 进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。
4) 为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到低。
5) 产品包装内含质粒pUC19 DNA(0.1ng/μl),供对照实验用。
6) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法所有操作均在无菌条件的标准下进行
1) 取感受态细胞置于冰浴中,如需分装可将刚刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管内,置于冰浴中。注意:一次转化感受态细胞的建议用量为50-100 μl,可以根据实际情况分装使用。需注意所用DNA体积不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。
注意:
a)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多,可取少量转化产物涂布平板;反之,若转化的DNA总量较少,可取200-300 μl转化产物涂布平板。若预计的克隆较少,可通过离心(4,000 rpm,2min)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于一个平板中。
b)新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
c)涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
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