钙黄绿素；Calcein
分子式：C30H26N2O13 分子量：622.53
简介：钙黄绿素是一种钙依赖性荧光分子。 主要需要在体内条件下研究骨代谢，并有助于在体外条件下对凹坑区域进行染色。 钙黄绿素用于荧光测定钙和EDTA（乙二胺四乙酸）钙的滴定。细胞毒性很低，所以钙黄绿素常作为荧光探针去染活细胞的。
别名：Bis[N,N−bis(carboxymethyl)aminomethyl]fluorescein, Fluorescein-bis(methyliminodiacetic acid), Fluorexon
物理性状及指标：
外观：……………………黄色至棕色固体
熔点：……………………200℃
溶解性：…………………微溶于水；1MNaOH (50 mg/ml)
干燥失重：…………………≤10%
荧光最大发射波长：……509nm(pH7.4)
荧光最大激发波长：……470nm(pH7.4)
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用途及描述：科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。本品为络合指示剂、荧光指示剂。钙黄绿素被用于镁存在环境中钙荧光检测和EDTA滴定，也可以用来检测具有耐药性蛋白药物的相互作用。主要用于络合滴定钙，也可用于测定锶、钡、铜、锰、钴、镍、钼、铬等。Calcein另外在核酸扩增过程中会形成大量的焦磷酸根离子。荧光染料中的锰离子与钙黄绿素结合导致荧光淬灭，同时染料颜色为橙色。当扩增反应形成焦磷酸根离子时，锰离子与焦磷酸根离子结合形成焦磷酸锰，引起荧光信号的产生，同时染料颜色变为黄绿色。钙黄绿素目前已广泛应用于恒温扩增反应的荧光检测。
运输条件：常温运输
使用方法推荐：
钙黄绿素染色步骤
1、用DMSO制备1 mM 的钙黄绿素溶液，并用PBS将其稀释制成1～50 μM的钙黄绿素溶液。
2、将1/10细胞培养基体积的钙黄绿素溶液加入到细胞培养基中。
3、在37℃培养细胞15-30分钟。
4、用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
5、用490 nm激发波长，515 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
【注意】：
a、如果钙黄绿素溶液很难进入细胞，可以使用表面活性剂，如Pluronic F127。
b、或者您也可以用1/10浓度的Calcein-AM溶液代替培养基。
c 、我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
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