Nylon Wool Fiber, Syringe (Gamma Irradiated)
尼龙毛纤维预装柱(γ射线辐射处理)
常见应用:
尼龙毛纤维(Nylon Wool Fiber, NWF)可从外周血中分离淋巴细胞(leukocytes),从B细胞中分离T细胞。粒细胞和B细胞能吸附到纤维上,而T细胞和其他细胞不会脱落会留在纤维上。
产品特征:
○ 单循环纯化能将B细胞占比降低到<3%,而通过第二根柱子的再次循环纯化降低B细胞<0.5%。
○ <0.5% B细胞可通过过滤装1g尼龙毛纤维,加载5×107细胞的更大柱子来纯化;但用此法T细胞的得率不如用小体积柱子的二次循环。
○ B细胞吸附到尼龙毛是一个活化过程,相比较于37℃,在20℃或4℃活性降低。
○ 尼龙毛分离得到的细胞制备物,基本没有贴壁细胞、死细胞和细胞碎片。
○ 尼龙毛分离得到的1g细胞内阳性细胞回收量据报道高达90%——虽大部分情况回收量在67%-85%之间。
尼龙毛(VWF)& SRBC玫瑰花环实验分离淋巴细胞:
Wong and Mittal(1981)年做了大量的实验来比较尼龙毛(NWF)分离方法和通用且研究通透的绵羊红细胞玫瑰花环实验(SRBC Rosetting)。实验目的在于分离B细胞用于HLA-DR抗原的血清型。
根据表1的分离效率比较数据,其总结到:基于NWF的简单和可靠性,尼龙毛吸附法优于SRBC resetting用于B细胞的常规表型鉴定。
表1 |
SRBC |
NWF |
||
细胞平均数(×106) |
%(B&T淋巴细胞) |
细胞平均数(×106) |
%(B&T淋巴细胞) |
|
T细胞 |
9.0±4.4 |
67±15.9 |
8.2±3.9 |
65±19.9 |
B细胞 |
0.7±0.4 |
6.2±2.6 |
0.8±0.5 |
6.9±3.5 |
数据来源: |
J. Immunol Methods, 46, 177-186, 1981. |
见表2,SRBC VS NWF方法的优势/劣势比较。
表2 |
SRBC |
NWF |
B细胞纯度 |
高 |
低 |
非淋巴细胞污染 |
高 |
低 |
技术步骤 |
复杂 |
简单 |
分离速度 |
慢 |
快 |
需要试剂 |
许多 |
少量 |
数据来源: |
J. Immunol Methods, 46, 177-186, 1981. |
品牌 | 货号 | 名称 | 规格 |
Polysciences | 21759-1 | Nylon Wool Fiber Columns尼龙毛纤维(预装柱) | 10 syringes |
产品特征:即用型,直接用于细胞分选步骤。500mg尼龙毛纤维预装在10cc注射器中,经γ射线辐射处理(25.0 – 40.0 kGy)。室温保存。
品牌 | 货号 | 名称 | 规格 |
Polysciences | 18369-10 | Nylon Wool Fiber 尼龙毛纤维(散装) | 10g |
Polysciences | 18369-50 | Nylon Wool Fiber 尼龙毛纤维(散装) | 50g |
Nylon Wool Fiber, Syringe 尼龙毛纤维预装柱 免疫细胞组织化学
Nylon Wool Fiber, Syringe 尼龙毛纤维预装柱 免疫细胞组织化学